| 查看: 940 | 回复: 2 | |||
[交流]
【求助/交流】双杂交探针与溶解曲线分析 已有1人参与
|
|
大家都知道，在荧光定量PCR中使用饱和荧光染料可对PCR产物进行高分辨率溶解曲线分析，其中的原理是比较简单的，较为容易理解。 同时在定量PCR中也可使用双杂交探针即是有两条探针，上游探针的3`端标记供体荧光基团，相邻下游探针的5`端标记Red 640受体荧光基团。当复性时，两探针同时结合在模板上，供体基团和Red640受体基团紧密相邻（距离1—5bp），激发供体产生的荧光能量被Red640基团吸收，使得检测探头可以检测到Red640发出波长为640的荧光。当变性时，两探针游离，两基团距离远，不能检测到640波长的荧光。 双杂交探针也可用于定量PCR后的溶解曲线分析，但对其中的原理一直不太了解，其是通过检测3‘端的荧光基团还是640荧光？检测得到的Tm值是完整DNA片段的还是上游探针结合片段或下游探针结合片段的Tm值？望高手指点！ [ Last edited by wdy0330 on 2010-7-20 at 10:42 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有142人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
2楼2010-07-21 09:54:55
3楼2010-07-21 17:05:23