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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】毛细管电泳的几个问题
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水水726

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】毛细管电泳的几个问题 已有3人参与

请教几个毛细管电泳的问题：缓冲液选择原则是什么？分析物质偏酸性碱性或中性时，分别选择什么样的缓冲液？为什么？峰形保留时间不好或出峰情况不好时，该怎么调整？？谢谢各位指教！
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1楼 2010-07-19 21:45:57
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阿斯楞

银虫 (小有名气)
如果使用的CZE模式，考虑到样品要带有效电荷，那么碱性的选低pH缓冲液，此时样品带正电荷；酸性的选高pH缓冲液，此时样品带负电荷。中性样品同时不宜使用CZE模式，应选用MECC，当然碱性和酸性样品从增加分离选择性角度考虑，有很多时候也选用MECC。CE重现性是制约其发展的硬伤，不同样品，提高重现性的方法不尽相同，比如对于水溶性特别不好的样品，在背景电介质中加入有机溶剂重现性会有所改善。
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5楼2010-07-21 09:32:32
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★ ★ ★
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happy169(金币+2, ACI+1):thanks！ 2010-07-20 15:31:06
一般首先优化buffer的pH，最常使用的是磷酸盐缓冲体系，但是磷酸盐缓冲体系需要较长的平衡时间，然后优化离子强度，还有添加剂等条件；酸性物质在高pH下会带有负电荷，在高pH下，EOF指向阴极，因此可以加速被测物质的出峰，所以一般首选碱性buffer进行实验，不过酸性物质也可以在中性或偏酸性的buffer中得到分离；中性物质在分离时必须依靠电渗流，因此buffer的pH最好能高于3.5。峰形不好的原因很多，需要具体问题具体分析。保留时间不稳定一般是因为没有平衡好capillary所造成的，可以增大平衡时间。还有电压要选择好！
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七窍通了六窍
2楼2010-07-19 22:08:31
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ghy2099

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by platto at 2010-07-19 22:08:31:
一般首先优化buffer的pH，最常使用的是磷酸盐缓冲体系，但是磷酸盐缓冲体系需要较长的平衡时间，然后优化离子强度，还有添加剂等条件；酸性物质在高pH下会带有负电荷，在高pH下，EOF指向阴极，因此可以加速被测物 ...

弱弱的问一下，EOF是什么？为什么是指向阴极的呢？
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3楼2010-07-20 10:19:50
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
EOF是电渗流的意思。是指在电场的作用下，毛细管内的buffer的定向流动。楼主可以看看相关书籍。
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七窍通了六窍
4楼2010-07-20 11:45:56
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