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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】内标法疑问
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lihxwh

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助】内标法疑问已有11人参与

我最近在做一个内标法测含量的实验，有几个地方比较困惑想问一下大家

书上说  配制一系列不同浓度的对照液，并加入相同量的内标物，进样分析测Ai和As，以Ai/As对对照溶液浓度作图。然后计算试样浓度，试样液配制时也需要加入与对照液相同量的内标


我的问题是
1.加入相同量的内标是指加入后各对照液内标的浓度相等还是加入相同量的内标稀释后内标浓度不一定相等
2试样液也需要加入与对照液相同量的内标 是指加入后试样液内标的浓度和对照液相等还是加入与对照液相同量的内标但稀释后内标浓度不一定和对照液相等

3.这个方法还需要矫正因子吗，我怎么没见书上测矫正因子啊


希望大家能给帮忙解答一下

上述问题已解决 大家看一下这个例题



溶液的配置

内标溶液  配置为1ug/ml

对照品溶液 精密称取对照品10mg，用流动相稀释为0.5、1、2、10、20、100、200ug/ml的对照品溶液
样品处理

精密吸取血清样本250ul 置10ml居赛塞玻璃离心管中，内标溶液10ul  涡旋1min。加甲醇3ml我涡旋3min 9000r/min离心 精密吸取甲醇层500ul 置于领一离心管中401度氮气吹干。残渣用0.1ml流动相溶解，涡旋30s 用0.22um微孔滤膜过滤，待测

我的问题是
供试品中加入了10ul 内标溶液  那么配置标准品时应该怎么加那
最好能说一下具体过程

真是麻烦大家了  请多指教

[ Last edited by lihxwh on 2010-7-19 at 16:57 ]
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希望能在这里和大家一块快乐的学习
1楼2010-07-19 01:46:25
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燕飞飞

金虫 (正式写手)
lihxwh(金币+1): 2010-07-19 10:49:55
lihxwh(金币+1):鼓励 2010-07-19 16:00:41
[quote]Originally posted by 80年后 at 2010-07-19 06:56:08:
举个例子：假如你所有的溶液都配制在50ML的容量瓶中，配制五个浓度的对照液，就要移取0 1 2 3 4毫升储备液到这五个容量瓶中 然后加入相同体积等浓度的内标溶液 稀释定容到刻度
试样液也是加入同体积等浓度的内标 ... [/quo表达的很清楚了，O(∩_∩)O~哈哈
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拥有自由才会快乐
4楼2010-07-19 09:36:50
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普通回帖

80年后

金虫 (正式写手)
lihxwh(金币+1):谢谢 2010-07-19 10:48:42
举个例子：假如你所有的溶液都配制在50ML的容量瓶中，配制五个浓度的对照液，就要移取0 1 2 3 4毫升储备液到这五个容量瓶中 然后加入相同体积等浓度的内标溶液 稀释定容到刻度
试样液也是加入同体积等浓度的内标溶液 然后根据你的标准曲线计算浓度就可以了
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2楼2010-07-19 06:56:08
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大山5662

银虫 (小有名气)
lihxwh(金币+1):谢谢 2010-07-19 10:49:36
样品中内标浓度与对照浓度相同，指的是对最终浓度；作线性时内标浓度也应相同，不变最好。
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3楼2010-07-19 08:56:53
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lihxwh

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 80年后 at 2010-07-19 06:56:08:
举个例子：假如你所有的溶液都配制在50ML的容量瓶中，配制五个浓度的对照液，就要移取0 1 2 3 4毫升储备液到这五个容量瓶中 然后加入相同体积等浓度的内标溶液 稀释定容到刻度
试样液也是加入同体积等浓度的内标 ...

那试样液是不是也要加到50ml的容积啊 呵呵
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5楼2010-07-19 10:48:24
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zhfifi

金虫 (小有名气)
lihxwh(金币+1):非常感谢 2010-07-19 10:52:52
回答如下：
1.加入相同量的内标，稀释到相同的体积，所以内标浓度也是相等，但是你的对照样的浓度是不相等的。（因为你要做的是不同浓度的标准曲线，所以稀释完后的对照样品浓度肯定是不等的，但是内标浓度都是一样的。）
2.样品中的内标的加入量就是如1所述的内标物的量，稀释完最终体积也要和1的体积一样。（如果1中是5mL内标最终稀释到50mL,那么此时也是加入5mL内标最终稀释到50mL.）
3.你作的标准曲线就类似于你的矫正因子。
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6楼2010-07-19 10:48:29
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lihxwh

铜虫 (正式写手)
我还有一点疑问 内标法德斜率和截距表示什么意思那
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7楼2010-07-19 10:50:48
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xkp123

木虫 (著名写手)
lihxwh(金币+1): 2010-07-19 15:44:29
lihxwh(金币+1): 2010-07-19 15:44:55
lihxwh(金币+1):鼓励 2010-07-19 16:00:57
引用回帖:
Originally posted by lihxwh at 2010-07-19 10:50:48:
我还有一点疑问 内标法德斜率和截距表示什么意思那

斜率表示你方法的灵敏度，截距表示空白响应值，斜率是越大越好，说明方法的灵敏度越高，截距越小越好
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8楼2010-07-19 11:36:47
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xkp123

木虫 (著名写手)
lihxwh(金币+1): 2010-07-19 15:44:48
总之，你就把所有的样品定容一个体积吧，这样加入内标物德的量就可一样了，这个很好搞定的
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9楼2010-07-19 11:42:38
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lihxwh

铜虫 (正式写手)
大家看一个实例

溶液的配置

内标溶液  配置为1ug/ml

对照品溶液 精密称取对照品10mg，用流动相稀释为0.5、1、2、10、20、100、200ug/ml的对照品溶液
样品处理

精密吸取血清样本250ul 置10ml居赛塞玻璃离心管中，内标溶液10ul  涡旋1min。加甲醇3ml我涡旋3min 9000r/min离心 精密吸取甲醇层500ul 置于领一离心管中401度氮气吹干。残渣用0.1ml流动相溶解，涡旋30s 用0.22um微孔滤膜过滤，待测

我的问题是
供试品中加入了10ul 内标溶液  那么配置标准品时应该怎么加那
最好能说一下具体过程

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