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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】转化时42度热激时间？
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tian1203

银虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】转化时42度热激时间？ 已有7人参与

绝大多数都是42度90秒？
问题一：为啥是42度？为啥是90秒？
问题二：有些说明说说45秒，比如pMD18Simple载体
以前我都是90秒，这次90秒不长菌，和热激时间有关吗？
请高人指点。
非常感谢！！!
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别紧张，我不是什么好人...
1楼 2010-07-18 15:27:58
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lao7

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-07-18 18:38:57:
不能说完全没有关系~~
首先氯化钙法制备的感受态，确实，DNA首先附在细胞壁上，然后经过温度反应使得DNA能够进入。但是细菌是存在核酸酶系统的，这样保证在天然的转化过程中不会吸错DNA。异源的DNA会被内源性的核 ...

我很同意楼主这种看法，最近我正在做一个类似的实验。我感觉热激和加入CaCl2的方法的解释有一定的说服力，但是没有找到这样的文章解释的详细报道。
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11楼2010-07-24 13:22:49
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
看天(金币+2):热心的ATP 我过几天要评选你 好吗 2010-07-18 15:48:27
看天(金币+2):热心的ATP 我过几天要评选你 好吗 2010-07-18 15:48:48
1、这个温度很适合HSP表达和起作用，当然由于热传导效率的差异，其实42~45都有人做。当然热激温度还得考虑对感受态生存的影响。42度只能说是经验。包括时间也是如此，可以调整。大的质粒可以热激久一些。通常60~90s足够了
2、同1
3、不长菌你先做个阳性对照吧~排查
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2楼2010-07-18 15:34:26
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看天

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking:热心的ATP 我过几天要评选你 好吗 什么意思？ 2010-07-18 17:41:24
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-07-18 15:34:26:
1、这个温度很适合HSP表达和起作用，当然由于热传导效率的差异，其实42~45都有人做。当然热激温度还得考虑对感受态生存的影响。42度只能说是经验。包括时间也是如此，可以调整。大的质粒可以热激久一些。通常60~9 ...

有延迟 竟然重复评了
赞一下(2人) 回复此楼
戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
4楼2010-07-18 15:50:00
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看天

木虫 (知名作家)
amisking:你发了两次贴，看来网速不行。尽量少点发布。 2010-07-18 17:41:43
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-07-18 15:34:26:
1、这个温度很适合HSP表达和起作用，当然由于热传导效率的差异，其实42~45都有人做。当然热激温度还得考虑对感受态生存的影响。42度只能说是经验。包括时间也是如此，可以调整。大的质粒可以热激久一些。通常60~9 ...

有延迟 竟然重复评了
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
5楼2010-07-18 15:50:22
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