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qianru

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】大孔树脂洗脱剂的问题 已有6人参与

本人正用大孔树脂分离色素,分别用水,25%乙醇,50%乙醇,75%乙醇洗脱,最后想用无水乙醇将柱子洗干净,洗了两天了,仍然洗不净,洗脱液在紫外区的吸收峰大小基本不变,请问我应该怎么处理呢?
      还有一个问题,关于洗脱剂什么时候换,有人说当流出液的成分基本不变时,就可以换了,为什么不是等这个成分洗脱到差不多完全了再换呢?
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kaola0916

铁杆木虫 (著名写手)


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单看柱子的颜色有时候是不准的!有的看上去没事,用氢氧化钠一冲,黑色的哗哗的下来啊!不知道你用氢氧化钠冲了没有?

换梯度的时间可以根据柱子上色谱带的颜色分段收集,或者一个梯度下流出液没颜色了就换下个梯度,同时做TLC跟踪。
8楼2010-07-18 13:27:30
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普通回帖

致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音


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无水乙醇洗不干净
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-07-17 19:13:16
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lsjalhjfe

银虫 (小有名气)

★ ★
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karl2100(金币+1):3Q 2010-07-17 23:25:13
试试用低浓度的酸或碱洗洗,主要看你的目标产物的酸碱性。然后在用蒸馏水冲洗至中性,再进行下一步。
3楼2010-07-17 20:37:11
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hdh323

木虫 (正式写手)

★ ★
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karl2100(金币+1):谢谢! 2010-07-17 23:25:35
先用碱水冲,然后用酸水冲,最后用水冲至中性
4楼2010-07-17 21:04:25
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qianru

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lsjalhjfe at 2010-07-17 20:37:11:
试试用低浓度的酸或碱洗洗,主要看你的目标产物的酸碱性。然后在用蒸馏水冲洗至中性,再进行下一步。

HCl 和 NaOH 行不行,多大浓度比较好啊?
5楼2010-07-18 10:19:47
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kaola0916

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
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xiaodu2007693(金币+1):谢谢,很详细 2010-07-18 16:44:52
引用回帖:
Originally posted by qianru at 2010-07-18 10:19:47:

HCl 和 NaOH 行不行,多大浓度比较好啊?

可以的。先用HCl浸泡2-4个小时,再用3倍体积的冲柱,浓度可选2%-3%,水洗至中性。
           接着NaOH浸泡2-4小时,再用3倍体积的冲柱,浓度选5%,水洗至中性
          酸碱冲柱有时候也不一定3倍体积,视流出液而定,我一般冲到基本无色 为止,也可以不浸泡,直接多几个保留体积冲柱。
后用乙醇洗2-3个被体积,乙醇洗的时候建议中间设两个缓冲的浓度,不然会有气泡产生。
最后用水洗洗去乙醇备用。

看上去很是麻烦,我处理了一天多的时间。但效果会很好的!
6楼2010-07-18 11:02:38
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qianru

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by kaola0916 at 2010-07-18 11:02:38:


可以的。先用HCl浸泡2-4个小时,再用3倍体积的冲柱,浓度可选2%-3%,水洗至中性。
           接着NaOH浸泡2-4小时,再用3倍体积的冲柱,浓度选5%,水洗至中性
          酸碱冲柱有时候也不一定3倍体积,视 ...

多谢多谢,呵呵,我看文献说要是柱子颜色变深就用酸碱冲洗,但是我的柱子现在也没有颜色,怎么知道洗干净了呢?
7楼2010-07-18 12:59:35
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lsjalhjfe

银虫 (小有名气)


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五楼及下面的回答很精彩,很值得你借鉴。嘿嘿
9楼2010-07-18 18:17:12
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qianru

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by kaola0916 at 2010-07-18 13:27:30:
单看柱子的颜色有时候是不准的!有的看上去没事,用氢氧化钠一冲,黑色的哗哗的下来啊!不知道你用氢氧化钠冲了没有?

换梯度的时间可以根据柱子上色谱带的颜色分段收集,或者一个梯度下流出液没颜色了就换下个 ...

好的,明白了!我用碱冲冲看,多谢!
10楼2010-07-18 19:33:57
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