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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】大孔树脂洗脱剂的问题
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qianru

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】大孔树脂洗脱剂的问题 已有6人参与

本人正用大孔树脂分离色素，分别用水，25%乙醇，50%乙醇，75%乙醇洗脱，最后想用无水乙醇将柱子洗干净，洗了两天了，仍然洗不净，洗脱液在紫外区的吸收峰大小基本不变，请问我应该怎么处理呢？
      还有一个问题，关于洗脱剂什么时候换，有人说当流出液的成分基本不变时，就可以换了，为什么不是等这个成分洗脱到差不多完全了再换呢？
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1楼 2010-07-17 18:44:22
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

kaola0916

铁杆木虫 (著名写手)
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单看柱子的颜色有时候是不准的！有的看上去没事，用氢氧化钠一冲，黑色的哗哗的下来啊！不知道你用氢氧化钠冲了没有？

换梯度的时间可以根据柱子上色谱带的颜色分段收集，或者一个梯度下流出液没颜色了就换下个梯度，同时做TLC跟踪。
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8楼2010-07-18 13:27:30
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普通回帖

致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
★
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无水乙醇洗不干净
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-07-17 19:13:16
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lsjalhjfe

银虫 (小有名气)
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karl2100(金币+1):3Q 2010-07-17 23:25:13
试试用低浓度的酸或碱洗洗，主要看你的目标产物的酸碱性。然后在用蒸馏水冲洗至中性，再进行下一步。
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3楼2010-07-17 20:37:11
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hdh323

木虫 (正式写手)
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karl2100(金币+1):谢谢！ 2010-07-17 23:25:35
先用碱水冲，然后用酸水冲，最后用水冲至中性
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4楼2010-07-17 21:04:25
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qianru

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lsjalhjfe at 2010-07-17 20:37:11:
试试用低浓度的酸或碱洗洗，主要看你的目标产物的酸碱性。然后在用蒸馏水冲洗至中性，再进行下一步。

HCl 和 NaOH 行不行，多大浓度比较好啊？
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5楼2010-07-18 10:19:47
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kaola0916

铁杆木虫 (著名写手)
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xiaodu2007693(金币+1):谢谢，很详细 2010-07-18 16:44:52
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Originally posted by qianru at 2010-07-18 10:19:47:

HCl 和 NaOH 行不行，多大浓度比较好啊？

可以的。先用HCl浸泡2-4个小时，再用3倍体积的冲柱，浓度可选2%-3%，水洗至中性。
           接着NaOH浸泡2-4小时，再用3倍体积的冲柱，浓度选5%，水洗至中性
          酸碱冲柱有时候也不一定3倍体积，视流出液而定，我一般冲到基本无色 为止，也可以不浸泡，直接多几个保留体积冲柱。
后用乙醇洗2-3个被体积，乙醇洗的时候建议中间设两个缓冲的浓度，不然会有气泡产生。
最后用水洗洗去乙醇备用。

看上去很是麻烦，我处理了一天多的时间。但效果会很好的！
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6楼2010-07-18 11:02:38
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qianru

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by kaola0916 at 2010-07-18 11:02:38:


可以的。先用HCl浸泡2-4个小时，再用3倍体积的冲柱，浓度可选2%-3%，水洗至中性。
           接着NaOH浸泡2-4小时，再用3倍体积的冲柱，浓度选5%，水洗至中性
          酸碱冲柱有时候也不一定3倍体积，视 ...

多谢多谢，呵呵，我看文献说要是柱子颜色变深就用酸碱冲洗，但是我的柱子现在也没有颜色，怎么知道洗干净了呢？
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7楼2010-07-18 12:59:35
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lsjalhjfe

银虫 (小有名气)
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五楼及下面的回答很精彩，很值得你借鉴。嘿嘿
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9楼2010-07-18 18:17:12
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qianru

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by kaola0916 at 2010-07-18 13:27:30:
单看柱子的颜色有时候是不准的！有的看上去没事，用氢氧化钠一冲，黑色的哗哗的下来啊！不知道你用氢氧化钠冲了没有？

换梯度的时间可以根据柱子上色谱带的颜色分段收集，或者一个梯度下流出液没颜色了就换下个 ...

好的，明白了！我用碱冲冲看，多谢！
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10楼2010-07-18 19:33:57
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