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luo_violet

[交流] 【求助/交流】关于6-OHDA对细胞作用 已有4人参与

大家好,我现在在做有关SY5Y细胞活性的实验,我加入6-OHDA作为损伤剂,按照以前文献的做法,我发现6-OHDA都是以100uM的浓度加进去的,MTT试验中损伤约为60%,但是我加100uM后,损伤只有30%左右,但是之后做荧光和流式测凋亡时,却收集不到细胞,细胞都破碎了,如果说是100uM损伤过重的话,那MTT时为什么损伤那么小呢,我有点迷惑啊,初接触细胞试验,很是不懂。不知道有没有做过6-OHDA在细胞上实验的同学啊,你们用的浓度是多少?或者有没有人也碰到过这种情况呀?
万分感谢能帮忙!
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木头tfboys

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,我想请问一下你的6OHDA是拿什么配制的?生理盐水还是PBS,加抗坏血酸了么。我 现在也想造模,实在是不知道怎么选择。
5楼2018-05-28 11:29:54
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

引用回帖:
Originally posted by luo_violet at 2010-07-16 13:48:23:
大家好,我现在在做有关SY5Y细胞活性的实验,我加入6-OHDA作为损伤剂,按照以前文献的做法,我发现6-OHDA都是以100uM的浓度加进去的,MTT试验中损伤约为60%,但是我加100uM后,损伤只有30%左右,但是之后做荧光和 ...

不懂帮顶
小木虫之有关部门负责人
2楼2010-07-16 17:57:01
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
amisking(金币+2):^_^ 2010-07-16 21:37:30
不同实验室的细胞株有时候差异就挺大的
而且还有你种板的密度,药的纯度,培养基,血清等都有影响
反正造模成功就好了
3楼2010-07-16 20:42:59
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎交流~~ 2010-07-24 12:43:28
有楼上说的相关因素影响
说不定你两次处理细胞差异就很大,可能自己没有感觉到
另外
我觉得MTT的结果不准确也很可能导致些情况
你不如通过显微镜提前观察下细胞的存活情况
就明白MTT是不是准确了。
4楼2010-07-24 09:03:13
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