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fusheng011

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[交流] 【求助/交流】如何使用水饱和酚？已有4人参与

大家好请教个问题我把我的质粒用体外转录试剂盒体外转录后说明书上说要对转录后的RNA进行纯化其中有一步说用酚/氯仿（1:1比例）抽提请问大家谁用过酚/氯仿（1:1比例）这个是如何配制的呀？

另外，请教大家谁用过用过水饱和酚？我直接从生物公司买到了一瓶水饱和酚但是看到有分层（分上下两层，下层比较多）摇荡均匀静止后马上又出现分层我不知道用的时候是吸取上层用还是吸取下层用麻烦指教！！

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1楼 2010-07-08 20:14:12

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fusheng011

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引用回帖:

Originally posted by ben1147 at 2010-07-08 21:08:11:
水饱和酚上层是水，两个作用：一是水封，防止下层酚接触空气被氧化；二是保证下层的酚里水的饱和度。

酚：氯仿=1:1就是水饱和酚（RNA纯化用水饱和酚，DNA纯化用Tris饱和酚）和氯仿等体积混匀。12000rpm离心2mi ...

您好再请教一下按照您说的那我要做转录后RNA的纯化按照步骤我需要先配制1:1的酚氯仿就是把买回的水饱和酚和氯仿等体积混合然后高速离心后弃掉上层的水相就是1:1的酚氯仿了然后拿着1:1的酚氯仿进行下步的操作对吧？

如果我是提取或者纯化DNA的话 1:1的酚氯仿就要用Tris饱和酚和氯仿等体积混合然后离心是这样的吗？谢谢