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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求：流式高手-使用流式细胞技术的问题
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wangjin248

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求：流式高手-使用流式细胞技术的问题 已有3人参与

本人使用荧光原位杂交结合流式细胞计数的方法测定肠道细菌，总菌用FITC标记，双岐用CY5标记。总菌的FITC可检出，但CY5却检不出，大家分析一下是为什么？
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1楼 2010-07-07 13:39:26
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wangjin248

木虫 (小有名气)
dhd997:请不要纯表情发帖。 2010-07-07 13:54:41
2楼2010-07-07 13:50:15
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
不是有仪器管理员吗？问管理员就行了。
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3楼2010-07-07 15:33:40
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
可能细菌太小，CY5的荧光又弱，很难分辨。
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4楼2010-07-07 15:35:22
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wangjin248

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jurkat.1640 at 2010-07-07 15:33:40:
不是有仪器管理员吗？问管理员就行了。

管理员也不知道。
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5楼2010-07-07 17:31:58
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wangjin248

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jurkat.1640 at 2010-07-07 15:35:22:
可能细菌太小，CY5的荧光又弱，很难分辨。

有什么解决办法吗？提高探针浓度？
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6楼2010-07-07 17:32:45
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
CY5发什么颜色的荧光，造成流式的通道选择不正确。
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梦在路就在！
7楼2010-07-07 20:21:05
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wangjin248

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 雪山飞狐7233 at 2010-07-07 20:21:05:
CY5发什么颜色的荧光，造成流式的通道选择不正确。

Cy5耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。激发后应该是红色。正确的应该是选择哪个通道？
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8楼2010-07-08 08:58:22
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
引用回帖:
Originally posted by wangjin248 at 2010-07-08 08:58:22:

Cy5耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。激发后应该是红色。正确的应该是选择哪个通道？

应该选P3（FITC）和P4红光通道，试试吧，祝你好运。
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梦在路就在！
9楼2010-07-08 10:44:29
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wangjin248

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 雪山飞狐7233 at 2010-07-08 10:44:29:


应该选P3（FITC）和P4红光通道，试试吧，祝你好运。

我们这个通道不是这样标记的，我想问问cy5用PerCP还是APC-A通道？初接触，不是很懂，谢谢了！
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10楼2010-07-08 19:08:04
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