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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】条件相同P出来不同的目的片段
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wangxueqin

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】条件相同P出来不同的目的片段 已有2人参与

向高人请教：
目前在竹子里面P一个片段，需要同时加BSA和DMSO，因为这个片段的GC含量有70%左右，在相同的条件，（反应体系，pcr程序，所用的pcr仪）一样的情况下，还是p出来不一样的片段。怎么回事啊？
比如前两天我p出来有两个目的片段，一个250的，一个800的，我是准备割胶800的纯化后再克隆 ，但是昨天一样的条件，就扩出来四五个目的片段，搞得我很郁闷啊，也不知道问题在哪里，每天加的BSA，DMSO也是一样的，至于会这么大的问题吗？
有哪位高人有过类似的经历么？谢谢了。
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1楼 2010-07-07 08:53:24
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):有这个可能，谢谢交流。 2010-07-07 10:27:07
试剂的不稳定相造成的，买好点的试剂在做~
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-07 09:32:55
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):也有可能，谢谢交流。 2010-07-07 10:27:19
模板或者试剂污染啦！
赞一下(2人) 回复此楼
霉菌
3楼2010-07-07 09:44:04
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