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wangxueqin

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】条件相同P出来不同的目的片段 已有2人参与

向高人请教:
目前在竹子里面P一个片段,需要同时加BSA和DMSO,因为这个片段的GC含量有70%左右,在相同的条件,(反应体系,pcr程序,所用的pcr仪)一样的情况下,还是p出来不一样的片段。怎么回事啊?
比如前两天我p出来有两个目的片段,一个250的,一个800的,我是准备割胶800的纯化后再克隆 ,但是昨天一样的条件,就扩出来四五个目的片段,搞得我很郁闷啊,也不知道问题在哪里,每天加的BSA,DMSO也是一样的,至于会这么大的问题吗?
有哪位高人有过类似的经历么?谢谢了。
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):也有可能,谢谢交流。 2010-07-07 10:27:19
模板或者试剂污染啦!
霉菌
3楼2010-07-07 09:44:04
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):有这个可能,谢谢交流。 2010-07-07 10:27:07
试剂的不稳定相造成的,买好点的试剂在做~
2楼2010-07-07 09:32:55
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