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lihuijunle

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR只有引物二聚体,有图 已有18人参与

如题:所用的引物是F338R518,F338上有GC夹子,直接用来扩增目的片段
以前这个引物我也做过,也扩的不错,体系也是原来的,但是现在每次扩总是出现引物二聚体,没有目的条带,如图所示

请教各位啦,是什么原因?
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hfkset

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我赞成调整模板的量,稀释梯度,退火温度也做个梯度,麻烦了一点,但应该能摸好体系。生物实验这东西,不要说以前的体系没事,这个说不准的
18楼2010-12-30 09:59:16
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gbrillia

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-07 06:27:14
可能是模板加的少了,以前我也遇到过的,但是我的目的条带有的,当时调整一下模板的量,并且加的准一些就好了。
2楼2010-07-06 16:27:47
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clare420

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提高退火温度看看
3楼2010-07-06 16:29:14
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陈思容

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我现在P也是同样的情况
4楼2010-07-06 17:09:26
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