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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR只有引物二聚体，有图
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lihuijunle

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR只有引物二聚体，有图 已有18人参与

如题：所用的引物是F338R518，F338上有GC夹子，直接用来扩增目的片段
以前这个引物我也做过，也扩的不错，体系也是原来的，但是现在每次扩总是出现引物二聚体，没有目的条带，如图所示

请教各位啦，是什么原因？
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1楼 2010-07-06 16:12:36
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gbrillia

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-07 06:27:14
可能是模板加的少了，以前我也遇到过的，但是我的目的条带有的，当时调整一下模板的量，并且加的准一些就好了。
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2楼2010-07-06 16:27:47
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clare420

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
提高退火温度看看
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3楼2010-07-06 16:29:14
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陈思容

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我现在P也是同样的情况
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4楼2010-07-06 17:09:26
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lihuijunle

木虫 (正式写手)
DNA提取的量还是很足的，我稀释了100倍，目前的退火温度是60到68度，还是这样子
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5楼2010-07-06 21:02:34
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苹果球球

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇到过这种情况，就是模板的问题，后来调整模板量就P出来了。
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6楼2010-07-06 21:29:51
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默默的等待

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-07-07 06:27:26
建议用GCbuffer+LA酶试试
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7楼2010-07-06 22:32:48
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lihuijunle

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 苹果球球 at 2010-07-06 21:29:51:
我也遇到过这种情况，就是模板的问题，后来调整模板量就P出来了。

请教一下，你是如何调整模板量呢？我是稀释了一系列的梯度，从100倍到800倍，你用的引物和我的一样吗？我的QQ595748189，加我QQ吧，方便交流，O(∩_∩)O谢谢
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8楼2010-07-06 22:51:07
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yesican

铁虫 (小有名气)
★
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第一次见到这东西 顶顶
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9楼2010-07-06 23:06:15
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
调整模板浓度，降低退火温度试试
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
10楼2010-07-06 23:50:08
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