24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
查看: 2202  |  回复: 26

liaoailing

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-07-05 16:46:26
maker都没有出来有可能是胶的问题。样品中的盐含量和离子含量过高的话也会影响。我以前的样品中盐含量过高也是没有条带,透析除盐后就好了。
11楼2010-07-05 16:35:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evebobo

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
对 之前一定要脱盐
12楼2010-07-05 16:38:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
加蛋白质太少了,marker也加得太少了
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2010-07-05 18:22:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~希望对楼主有所帮助~· 2010-07-12 13:13:27
固定液里的甲醇如果加到染色液里就不用单独固定了。

染色液如果是反复用的,G250太稀了即使是染再久也不会看的到条带。

脱色液不换的话,即使是没有蛋白质的地方也还是蓝色的,脱色过夜也还是一片蓝色。

mark可能是别人配得不好,浓度不对。酶液即使是有酶活力,蛋白质不够多也是看不出条带的。

43kd那么大,即使溴酚兰刚好跑出去也还是不会跑出去的,除非带电荷非常大,对泳速的影响比分子量还大。这个要看蛋白质的PI值和电泳液的pH值。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
14楼2010-07-05 18:29:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)

染色液可能不好用了,建议重新配一下。
15楼2010-07-09 10:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肽之

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
脱色时间没问题的,我经常脱一个晚上
16楼2010-07-09 17:12:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoyi0810

新虫 (小有名气)


lstt09nk(金币+1):感谢交流~ 2010-07-12 13:13:56
应该是胶的问题吧。。。
可以重新配下配胶的溶液。。。
跑的时候别让条带跑出头了
另外,酶液可以浓缩下再跑,因为考马斯亮蓝的灵敏度不是很高
如果酶量少,可以考虑 用银染。。。
伪小资要花粪涂墙~
17楼2010-07-12 10:18:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小乐

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):鼓励新虫交流~~ 2010-07-12 13:14:09
1、把分离胶的浓度配高点吧,配到12%分离效果好点。浓缩胶5%就可以的。
2、考马斯亮蓝的吸附能力很强的,过夜脱色很正常,不会因为这个原因的。
3、可能是样品浓度太低,建议浓缩下上样。
4、考马斯亮蓝会不会用是次数太多了?染不上色了,这个原因感觉要大一点,因为marker没条带。
互动互利互相学习
18楼2010-07-12 13:11:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白格子衬衫

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
脱色时间太长了吧
未及热爱,已然离开
19楼2010-07-12 13:32:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crren

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们之前也出现过类似问题,估计很可能是制胶的问题,还有电极缓冲液的问题,也可能是上样缓冲液出了问题吧,DTT是不是挥发了?
20楼2010-07-26 15:17:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liby 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见