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【求助/交流】SDS-PAGE跑不出带
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liby
铜虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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虫号: 785759
注册: 2009-06-03
性别:
MM
专业: 微生物资源与分类学
[交流]
【求助/交流】SDS-PAGE跑不出带
已有22人参与
我的目的蛋白大概是43KDa,我用了10%的分离胶,用考马斯亮蓝染色一个半小时,脱色一晚上,结果没带,marker都没出来,样品是我测过有酶活的发酵液。这是什么原因,请教各位
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1楼
2010-07-03 09:12:25
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jqq1985
银虫
(正式写手)
应助: 52
(初中生)
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散金: 5
红花: 3
帖子: 443
在线: 36.2小时
虫号: 583567
注册: 2008-07-25
专业: 生物大分子结构与功能
染色液可能不好用了,建议重新配一下。
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15楼
2010-07-09 10:58:55
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jiahaitao1016
金虫
(小有名气)
应助: 0
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帖子: 270
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虫号: 359289
注册: 2007-04-29
性别: GG
专业: 蛋白质组学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
染的时间不够吧,跑完胶加考马斯亮蓝后煮胶5min,然后脱色
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3楼
2010-07-03 10:41:39
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xzx135
铁杆木虫
(正式写手)
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(幼儿园)
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帖子: 487
在线: 108.7小时
虫号: 395546
注册: 2007-06-07
专业: 食品科学基础
★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-03 11:11:19
首先,我不认为是楼上说的对,染色时间够了。
我觉得是你的胶,或者电泳液出问题了,你看看SDS是不是加多了?这会让你的电泳跑得非常快,或者电泳液有问题,换新的。
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4楼
2010-07-03 11:03:45
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月月大可
木虫
(著名写手)
MolEPI: 3
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(小学生)
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在线: 295.7小时
虫号: 549127
注册: 2008-04-20
性别: GG
专业: 生物化学
★ ★ ★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-07-03 20:23:40
marker都没有,认真查找原因吧。
染色脱色感觉没多大问题,如有怀疑可以再染一次。
43KD也不太可能跑出去。再重复一次看看吧,注意细节。
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5楼
2010-07-03 11:15:09
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