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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE跑不出带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liby

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE跑不出带 已有22人参与

我的目的蛋白大概是43KDa,我用了10%的分离胶，用考马斯亮蓝染色一个半小时，脱色一晚上，结果没带，marker都没出来，样品是我测过有酶活的发酵液。这是什么原因，请教各位
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1楼 2010-07-03 09:12:25
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lksweepty

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我觉得你可以把原来的胶先银染下，以排除上样量不足的问题和染色液的影响
如果有条带，加大上样量重做考染。
如果是还是没有条带，我觉得可能问题就在样品处理上了，看看是不是样品需要脱盐？
胶可以用12%或者14%的，不过这个影响不大。10%也可以的。
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27楼2010-07-29 11:17:00
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jiahaitao1016

金虫 (小有名气)
★
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染的时间不够吧，跑完胶加考马斯亮蓝后煮胶5min，然后脱色
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3楼2010-07-03 10:41:39
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xzx135

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
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看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-03 11:11:19
首先，我不认为是楼上说的对，染色时间够了。
我觉得是你的胶，或者电泳液出问题了，你看看SDS是不是加多了？这会让你的电泳跑得非常快，或者电泳液有问题，换新的。
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4楼2010-07-03 11:03:45
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月月大可

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-07-03 20:23:40
marker都没有，认真查找原因吧。
染色脱色感觉没多大问题，如有怀疑可以再染一次。
43KD也不太可能跑出去。再重复一次看看吧，注意细节。
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5楼2010-07-03 11:15:09
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