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lixin1609

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC(Waters 600E)梯度洗脱进样时出现气泡(峰图产生大量负峰) 已有5人参与

用2475FLD检测器,自动进样系统一次进样量20微升。一开始至10分钟左右峰图很好,从10分钟开始到25分钟时开始大量出现气泡产生负峰,使峰图完全无法辨别。实验是用C18非极性柱用OPA柱前衍生测17种氨基酸。流动相速率1ml/min,A相是磷酸盐缓冲液,B相是乙腈/甲醇/水混合溶液。梯度洗脱是(A:100%至43%再回到100%)。请问出现气泡的原因是啥?求教达人。
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seatop

银虫 (小有名气)


happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-07-02 17:32:21
我检测氨基酸没有出现你这样的问题,不过流动相和你的不一样,B相是乙腈和水
4楼2010-07-02 10:54:35
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forging

金虫 (小有名气)

lixin1609(金币+1): 2010-07-02 11:44:42
你把purge阀打开,看看还能看见气泡不?
2楼2010-07-02 10:27:02
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yjj1314

金虫 (小有名气)

lixin1609(金币+1): 2010-07-02 11:44:45
甲醇和水相1:1混合时可能会产生气泡
3楼2010-07-02 10:33:38
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lixin1609

木虫 (正式写手)

3楼对不起,没有金币了,你能说说你的流动相是怎么构成的?可站内pm我。谢谢。
5楼2010-07-02 11:45:41
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