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[交流]
【求助/交流】细菌的扫描电镜前处理，问题何在 已有1人参与
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1、取材：细菌（大小：0.5 * 1~2 um，离心（4 ℃，10000 rpm，10 min）培养液获得菌体； 2、固定：4 ℃下，2.5 %戊二醛4小时，然后离心去除固定液； 3、离心清洗：磷酸盐缓冲液（0.1 mol,pH 7.0,用了少量硫酸和氢氧化钠调pH），3次； 4、离心脱水：递增梯度乙醇，每级先静置5-15 min，而后离心； 5、置换：叔丁醇（化学纯），常温静置15 min，4 ℃离心，叔丁醇成固态，难道要在25 ℃以上离心吗，这样我担心会影响菌体，可以怎么处理呢？（叔丁醇换成醋酸戊酯，是不是一个方法）？ 6、原本打算用真空冷冻干燥的！ 大家赐教呀，急切请求！ |
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scelab
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