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hunter3401

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】模板的有什么检测方法 已有4人参与

就是想问下,如果做PCR之前我想确定我的模板是否可用,有没有什么检测方法,意思是说:就是一般制得的模板都不会出问题吗?如果会出问题,能不能用什么方法在PCR之前进行检测?
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hunter3401

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-28 12:44:16:
什么模板?基因组还是质粒还是cDNA?

前两者电泳检测,并且一般不会有什么大问题,只要别有太多杂质影响PCR就行

cDNA用持家基因引物PCR验证。如果目的基因的引物已经确认能用,并且PCR体系也已建立,可以直 ...

就是做细菌16sDNA时候,提取的DNA,是cDNA吗?
4楼2010-06-30 22:43:39
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ben1147

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
什么模板?基因组还是质粒还是cDNA?

前两者电泳检测,并且一般不会有什么大问题,只要别有太多杂质影响PCR就行

cDNA用持家基因引物PCR验证。如果目的基因的引物已经确认能用,并且PCR体系也已建立,可以直接进行目的序列的PCR,相当于验证了
2楼2010-06-28 12:44:16
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风荻

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是啊,你是什么模板 啊?
3楼2010-06-30 10:04:33
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by hunter3401 at 2010-06-30 22:43:39:

就是做细菌16sDNA时候,提取的DNA,是cDNA吗?

应该是全基因组。我曾经将基因组冻存在-20℃,一年后还能进行扩增。

做16s的时候要比一般的PCR更注意避免污染。
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
5楼2010-07-01 16:18:11
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