应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】克隆连接时间
52/1返回列表
查看: 2445  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoru2010

[交流] 【求助/交流】克隆连接时间 已有11人参与

问一下大家做克隆的时候，一般多少度连接多长时间啊？我用的是PMD19-T载体，上次16度连了23小时，有个1000多的片段还是没连上，菌液PCR出现好多条带……PS：貌似PGEM-T载体25度时间长了什么也连不上
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-06-23 11:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010

引用回帖:
Originally posted by 雪山飞狐7233 at 2010-06-23 13:31:41:
16度连接过夜（12-16h）。连接不上还应该考虑载体与目的片段之间的比例（通常是1：3-10）

我就是载体1，目的片段3，载体只多不少，PMD和PGEM都是这样
赞一下 回复此楼
14楼2010-06-23 15:25:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

walker2898

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我做的连接一般是在4度和16度连接12小时，但是不是用你说的这个载体。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-06-23 11:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wywangying169

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-06-23 12:35:52

以前做克隆的时候，用的载体是PMD18，一般是4度连接过夜，也就是大概14个小时左右。现在在用一个试剂盒，载体是PEASY-T3，只要连接五分钟就可以了！

[ Last edited by wywangying169 on 2010-6-23 at 14:54 ]
赞一下(2人) 回复此楼
好好自学，好好工作
3楼2010-06-23 11:29:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010

引用回帖:
Originally posted by wywangying169 at 2010-06-23 11:29:22:

以前做克隆的时候，用的载体是PMD18，一般是16度连接过夜，也就是大概14个小时左右。现在在用一个试剂盒，载体是PEAY-T3，只要连接五分钟就可以了！

好强的载体？单卖多少钱a?
赞一下 回复此楼
4楼2010-06-23 11:37:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭