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月月大可

木虫 (著名写手)


dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-23 14:34:55
引用回帖:
Originally posted by 彤彤0122 at 2010-06-23 13:46:37:


其实我现在觉得是二硫键被氧气破坏掉也是文献上说的,文献上是厌氧诱导,但是厌氧诱导非常麻烦,还得不断调整PH,破壁什么都很麻烦。
你说用DTT,那样的话能恢复二硫键吗?

我平常使用的β-ME还是DTT都是为了半胱氨酸处于还原状态,至于这两种东西能不能打开已经错误形成的二硫键不清楚,不敢给出结论。

DTT这种东西还原性太强,如果后期蛋白要使用Ni柱纯化,就不能使用这种东西。能把Ni离子给还原了,柱子由原来的蓝色直接变成褐色。β-ME可使用在5mM,基本不会影响(GE公司说他们的填料可以耐20mM)。
11楼2010-06-23 13:55:16
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