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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】氧气会不会使某些酶失活？？
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-23 14:34:55
引用回帖:
Originally posted by 彤彤0122 at 2010-06-23 13:46:37:


其实我现在觉得是二硫键被氧气破坏掉也是文献上说的，文献上是厌氧诱导，但是厌氧诱导非常麻烦，还得不断调整PH，破壁什么都很麻烦。
你说用DTT，那样的话能恢复二硫键吗？

我平常使用的β-ME还是DTT都是为了半胱氨酸处于还原状态，至于这两种东西能不能打开已经错误形成的二硫键不清楚，不敢给出结论。

DTT这种东西还原性太强，如果后期蛋白要使用Ni柱纯化，就不能使用这种东西。能把Ni离子给还原了，柱子由原来的蓝色直接变成褐色。β-ME可使用在5mM，基本不会影响（GE公司说他们的填料可以耐20mM）。
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11楼2010-06-23 13:55:16
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