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guogege

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】求助已有4人参与

请各位大侠们帮忙，谁有微量肉汤稀释法测MIC的标准详细的方法，包括接种菌液的浓度，如何操作。我是新手，还请各位帮忙！

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1楼2010-06-17 20:32:19

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skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)

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dhd997(金币+3):热心虫友，谢谢交流。 2010-06-18 13:03:05
lstt09nk(金币+2):解释的很详细，忍不住再给追加两个币币~~^_^ 2010-06-18 13:07:03

1.抗菌药物和培养基制备同常量肉汤稀释法。
2.MIC板制备无菌操作，将倍比稀释后不同浓度的抗菌药物溶液分别加到灭菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第11孔加药液，每孔10μl，第12孔不加药作为生长对照，冰冻干燥后密封，-20℃以下保存备用。
3.接种物制备将用生长法或直接菌悬液法制备的浓度相当于0.5麦氏比浊标准的菌悬液，经MH肉汤1∶1000稀释后，向每孔中加100μl，密封后置35℃普通空气孵箱中，孵育16~20h判断结果。当试验嗜血杆菌属，链球菌属时，孵育时间为20~24h，试验葡萄球菌和肠球菌对苯唑西林和万古霉素的药敏试验时孵育时间必须满24h。此时，第1孔至第11孔药物浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。
4.结果判断以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC。当阳性对照孔（即不含抗生素）内细菌明显生长试验才有意义。当在微量肉汤稀释法出现单一的跳孔时，应记录抑制细菌生长的最高药物浓度。如出现多处跳孔，则不应报告结果，需重复试验。通常对革兰阴性杆菌而言，微量肉汤稀释法测得的MIC与常量肉汤稀释法测得的结果相同或低一个稀释度（1孔或2倍）。