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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】请教紫外吸收波长的问题
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luoqinfly

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】请教紫外吸收波长的问题 已有7人参与

最近在做雷帕霉素的紫外吸收时发现，当浓度为1mg/ml时其最大吸收波长与文献相差较大，吸收波形异常；当降低浓度后又回复正常，我想请问一下这是为什么呢？是一个什么原理导致的？请各位大侠不吝赐教！
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1楼 2010-06-15 22:08:12
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inan

金虫 (小有名气)
★
pplover(金币+1):感谢参与！ 2010-06-16 17:10:21
luoqinfly(金币+1): 2010-06-16 21:08:18
浓度太大，吸光度太大，图形失真吧，降低浓度，控制吸光度在0.2-1左右谱图效果比较好~
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2楼2010-06-16 08:07:32
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sunxiaoli

木虫 (著名写手)
★
pplover(金币+1):感谢参与！ 2010-06-16 17:15:25
luoqinfly(金币+1):非常感谢你的热心帮忙 2010-06-16 21:08:53
一般浓度大点不至于连波长都位移吧，可能是溶剂效应、共轭效应什么引起的，看你具体怎么做的了
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3楼2010-06-16 08:56:46
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xkp123

木虫 (著名写手)
★ ★
pplover(金币+2):感谢参与！原理都说的那么清楚，呵呵…… 2010-06-16 17:16:04
luoqinfly(金币+1): 2010-06-16 21:09:00
浓度太大，有可能使得样品变成高聚物，又由于空间位阻效应使得共轭效应降低，因而最大吸收波长会发生移动
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4楼2010-06-16 10:21:31
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zqhlxrzrq

金虫 (小有名气)
★
pplover(金币+1):感谢参与！ 2010-06-16 17:22:50
luoqinfly(金币+1): 2010-06-16 21:09:09
浓度不能太大了，一般配10负6次方。
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前进1步是“先进”；前进2步是“先驱”；前进3步是“先烈”。宁成“先烈”不为“先进”。
5楼2010-06-16 14:41:51
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xkp123

木虫 (著名写手)
luoqinfly(金币+1): 2010-06-16 21:09:17
引用回帖:
Originally posted by zqhlxrzrq at 2010-06-16 14:41:51:
浓度不能太大了，一般配10负6次方。

微克级就行，毫克级也勉强可以
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6楼2010-06-16 16:52:26
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lovefred

银虫 (正式写手)
溶剂和文献一样么？
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7楼2010-06-16 19:00:59
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qingyy

木虫 (正式写手)
luoqinfly(金币+5): 2010-06-16 21:09:29
当浓度为1mg/ml时做紫外光谱的浓度就太大了，在这个浓度做出来的紫外光谱是不可靠的。
出现这种情况是正常的。首先你一定明白紫外光谱产生的原理。是由于化合物的电子吸收了紫外光的能量发生了电子跃迁引起。那么，紫外光谱仪器是根据它的工作原理来设计的，仪器的一般是光学零位平衡法或电学零位平衡法，其原理在这里一两句说不完。
测定时候，样品的浓度大，吸收就强。但是有一点，仪器的光源能量是有限的，不可能无限制的把样品的浓度加下去。当样品的浓度大到一定程度，超过了它的极限，就像几乎所有光都被样品吸收了的时候，就出现你上面说的情况了。在这种情况下，好比你使用玻璃片挡住了紫外光，吸收波形就异常，或出现不规则的乱线条。
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得意时平淡谦和，失意时志存高远。
8楼2010-06-16 19:49:01
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1143382710

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有在做人血的雷帕霉素吗？
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9楼2016-03-15 14:30:28
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