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【求助】请教紫外吸收波长的问题 已有7人参与
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| 最近在做雷帕霉素的紫外吸收时发现，当浓度为1mg/ml时其最大吸收波长与文献相差较大，吸收波形异常；当降低浓度后又回复正常，我想请问一下这是为什么呢？是一个什么原理导致的？请各位大侠不吝赐教！ |
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qingyy
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luoqinfly(金币+5): 2010-06-16 21:09:29
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当浓度为1mg/ml时做紫外光谱的浓度就太大了，在这个浓度做出来的紫外光谱是不可靠的。 出现这种情况是正常的。首先你一定明白紫外光谱产生的原理。是由于化合物的电子吸收了紫外光的能量发生了电子跃迁引起。那么，紫外光谱仪器是根据它的工作原理来设计的，仪器的一般是光学零位平衡法或电学零位平衡法，其原理在这里一两句说不完。 测定时候，样品的浓度大，吸收就强。但是有一点，仪器的光源能量是有限的，不可能无限制的把样品的浓度加下去。当样品的浓度大到一定程度，超过了它的极限，就像几乎所有光都被样品吸收了的时候，就出现你上面说的情况了。在这种情况下，好比你使用玻璃片挡住了紫外光，吸收波形就异常，或出现不规则的乱线条。 |
8楼2010-06-16 19:49:01