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lovefred

银虫 (正式写手)

[交流] 【讨论】KH2PO4和乙腈走梯度的问题。。 已有4人参与

问个事儿啊,A为水相:4gKH2PO4 或者NaH2PO4二水合物,加水至1000,H3PO4调PH至3.00,B为有机相:纯乙腈
梯度,先是高浓度水相,然后有机相慢慢增加,很缓慢。。最后是100%乙腈,水相是过0.22的膜,乙腈是默克的HPLC级,有时候会堵柱子,有时候不会。。有米高人指点下。。这个水相中盐浓度是不是太高了?和乙腈在某个比例会有析出?不知道B相中加10%的A相,会不会好点儿?

[ Last edited by lovefred on 2010-6-10 at 19:28 ]
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油鸡花雪

lovefred(金币+1):谢谢。 2010-06-11 10:26:23
我做过和你一样的梯度条件,盐比你的含量还要大,不过我B 用的是80%乙腈,你可以试试B里加百分比的水相试试,我自己做实验没发现色谱柱堵塞问题
3楼2010-06-11 09:50:54
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xiao49562000

铜虫 (小有名气)

lovefred(金币+1):谢谢,但是我有一个杂质,等度时要90%的有机相,大概10分钟才出来,我不想梯度走的时间超过50分钟,所以用了100乙腈,昨天才发现有堵柱子,以前都没有。 2010-06-11 10:25:44
个人意见:水相中盐浓度没有问题,倒是你的梯度终点100%的乙腈貌似太高,有可能导致盐析出。
2楼2010-06-10 22:01:10
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chency520

铜虫 (初入文坛)

lovefred(金币+1):谢谢。 2010-06-11 11:44:45
主要是在线混合时,当有机相的浓度高了就会造成盐析出,特别是Waters的仪器,特别容易把仪器的管路堵了,我遇见过这种问题
解决方法就是:1.按2楼说的做,在有机相里适当加点水相;
              2.当你做完实验后,首先要用大比例的水相冲洗柱子
4楼2010-06-11 11:40:26
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野狗般战斗着

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
据说是70%的乙腈就会析出,所以建议你还是别用纯乙腈去走梯度
5楼2014-07-14 14:50:07
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