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lovefred

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[交流] 【讨论】KH2PO4和乙腈走梯度的问题。。已有4人参与

问个事儿啊，A为水相：4gKH2PO4 或者NaH2PO4二水合物，加水至1000，H3PO4调PH至3.00，B为有机相:纯乙腈
梯度，先是高浓度水相，然后有机相慢慢增加，很缓慢。。最后是100%乙腈，水相是过0.22的膜，乙腈是默克的HPLC级，有时候会堵柱子，有时候不会。。有米高人指点下。。这个水相中盐浓度是不是太高了？和乙腈在某个比例会有析出？不知道B相中加10%的A相，会不会好点儿？

[ Last edited by lovefred on 2010-6-10 at 19:28 ]

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1楼2010-06-10 19:26:50

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xiao49562000

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lovefred(金币+1):谢谢,但是我有一个杂质，等度时要90%的有机相，大概10分钟才出来，我不想梯度走的时间超过50分钟，所以用了100乙腈，昨天才发现有堵柱子，以前都没有。 2010-06-11 10:25:44

个人意见：水相中盐浓度没有问题，倒是你的梯度终点100%的乙腈貌似太高，有可能导致盐析出。

2楼2010-06-10 22:01:10

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油鸡花雪

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lovefred(金币+1):谢谢。 2010-06-11 10:26:23

我做过和你一样的梯度条件，盐比你的含量还要大，不过我B 用的是80%乙腈，你可以试试B里加百分比的水相试试，我自己做实验没发现色谱柱堵塞问题

3楼2010-06-11 09:50:54

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chency520

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lovefred(金币+1):谢谢。 2010-06-11 11:44:45

主要是在线混合时，当有机相的浓度高了就会造成盐析出，特别是Waters的仪器，特别容易把仪器的管路堵了,我遇见过这种问题
解决方法就是：1.按2楼说的做，在有机相里适当加点水相；
2.当你做完实验后，首先要用大比例的水相冲洗柱子

4楼2010-06-11 11:40:26

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野狗般战斗着

铁虫 (小有名气)

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据说是70%的乙腈就会析出，所以建议你还是别用纯乙腈去走梯度

5楼2014-07-14 14:50:07

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