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yindongxue

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】透射电镜 已有1人参与

哪位虫友知道做透射电镜前植物固定的具体步骤啊?越详细越好!
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小葫芦

铜虫 (小有名气)

我以前用的的是0.1mol/L PB配置3%的戊二醛室温下固定6小时,缓冲液漂洗3次后再用1%的锇酸固定液后固定2h。
2楼2010-07-23 11:31:32
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superworkman

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyfgood: 金币+5, 很好,很全面,能注明出处就更好了! 2012-08-18 21:30:19
1.处理,取材。
2.初固定   
   固定于2%的戊二醛,过夜。(我一般青霉素小瓶装药品)
3.洗涤
   磷酸缓冲液30min,清洗3次
4.后固定
  1%锇酸,4度,过夜。
5.洗涤
  磷酸缓冲液洗涤,20min。重复3次。然后双蒸水洗涤,20min,重复两次。
6.脱水,渗透,包埋
  30%乙醇,30min。50%乙醇,30min。70%乙醇,30min。80%乙醇,30min。90%乙醇,30min。无水乙醇,30min。
    丙酮,30min。重复3次。
    丙酮:包埋剂 3:1,1h。丙酮:包埋剂 1:1,2h。丙酮:包埋剂 1:3,3h。纯包埋剂,过夜。
7.聚合
  恒温箱 37度,12h。45度,12h。60度,24h。
8.切片,染色,观察
凤翔千仞,非梧不栖!
3楼2012-08-18 17:11:07
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