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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】怎么洗以葡聚糖凝胶为填充迹的色谱柱?
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wlsky

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】怎么洗以葡聚糖凝胶为填充迹的色谱柱? 已有5人参与

最近做头孢类中聚合物的测定,但以葡聚糖凝胶为填充迹的色谱柱用了一个星期后,出现的色谱图的塔板数和拖尾因子都低于药典规定的标准,请问大家怎么洗柱子,可以提高其柱效,谢谢.
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1楼 2010-06-09 12:38:35
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油鸡花雪

★ ★
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karl2100(金币+1):谢谢！ 2010-06-09 13:48:13
我记得葡聚糖凝胶柱用纯水冲洗就可以了啊，葡聚糖凝胶柱容易生菌，所以保存最好用叠氮化钠保存，不过叠氮化钠有毒易爆而且还不好买，不知道是不是你保存没保存好，再加上天热就会生菌
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2楼2010-06-09 12:48:49
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lianying

银虫 (初入文坛)
★
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低浓度的缓冲盐溶液保存,保存温度为4—8度，切勿冰冻
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3楼2010-06-09 14:07:27
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wlsky

金虫 (小有名气)
我就拿水保存，拿如果柱效降低，该怎么活化呢？
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4楼2010-06-09 15:59:52
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油鸡花雪

★ ★ ★
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xiaodu2007693(金币+2):谢谢指教，很全面 2010-06-10 19:37:51
我想说的是绝对不能只用纯水保存凝胶柱，一旦滋生微生物及细菌肯定会影响柱子寿命，建议楼主为了抑制微生物的生长，可以使用低温保存，但温度不能过低，以免冻结，为了不冻结可以提高保存时介质的离子强度。
常用的保存抑菌剂有：0.02%叠氮钠、0.002%洗必泰（hibitane，双氯苯双胍己烷）、0.01%-0.02%三氯丁醇、0.1mol/l氢氧化钠。
也有用20%乙醇保存的

你现在塔板低了，没什么太好的办法，得看你的样品的性质，如果里面含有强极性的蛋白，实在没办法了就用6m的盐酸呱冲洗，如果条件允许就把这根柱子用不含醇类及卤素类的流动相冲洗后放置个2星期，柱效会恢复一点！
用0.5M的氯化钠冲洗半小时，再用50%乙醇溶液冲洗，也可以试试能不能再生。

实在不行只能废掉了，建议以后保存好一点吧
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5楼2010-06-09 16:09:09
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wlsky

金虫 (小有名气)
我的柱子是自己填充的，不是买的现出的凝胶柱子，那我想重新装柱子，能提高柱效吗？
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6楼2010-06-09 16:30:01
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wlsky

金虫 (小有名气)
怎么装，效果会好点，使葡聚糖凝胶活化，用什么溶剂冲洗，谢谢大家的帮助
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7楼2010-06-09 16:33:17
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pal2004

木虫 (正式写手)
★ ★
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xiaodu2007693(金币+1):谢谢交流 2010-06-10 19:38:11
给楼主个建议，既然是自己装的填料，不如试试Sephadex LH-20吧，分析多聚物不一定比G10差，尤其是进口的，比如GE的，而且最最关键的是，不用的时候你可以用甲醇保存。
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8楼2010-06-10 18:01:58
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seven9929

铁虫 (小有名气)
★ ★
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karl2100(金币+1):多谢提供！ 2010-07-07 18:02:11
我用的就是Sephadex LH-20，自己装的柱子，唯一的缺点就是稍微有点贵，不过保存起来很方便，甲醇就行！
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9楼2010-07-07 11:15:45
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