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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于HIV基因组的 5’-LTR
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houyanhui8

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于HIV基因组的 5’-LTR已有2人参与

1 有个考研题目，感觉摸不着头脑，请各位帮忙

HIV基因组5’端有一段长的末端重复序列（5’-LTR）,它对控制HIV的潜伏和激活起关键作用，因为它控制HIV的基因组的转录，请你设计出一个研究5’-LTR对基因转录的调控作用的方案，要求达到的目的是：①弄清楚5’-LTR 各部分序列对转录的作用。② 有哪些核内蛋白与LTR序列结合。条件：已有5’-LTR全长cDNA克隆。
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1楼2010-06-04 22:03:57
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jingcp200320

银虫 (小有名气)
★
houyanhui8(金币+1):谢谢参与
好像在哪里见过这个，一般好像分步敲出重复序列来研究，最后哪些核内蛋白与LTR结合时用酵母双杂交来研究，好像cell有相关文章可以看到！方法差不多~！
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2楼2010-06-07 11:00:52
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houyanhui8

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jingcp200320 at 2010-06-07 11:00:52:
好像在哪里见过这个，一般好像分步敲出重复序列来研究，最后哪些核内蛋白与LTR结合时用酵母双杂交来研究，好像cell有相关文章可以看到！方法差不多~！

是的，是的，大体就是这个思路，将5’-LTR 各部分序列分别截断，有重叠的克隆到荧光素酶报告载体上，分析这些序列对报告基因的表达影响，从而推断出哪部分序列对5’-LTR下游的基因起调控作用；
第二问用凝胶电泳迁移率改变（Gel shift）
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3楼2010-06-09 19:35:42
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