24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
查看: 1879  |  回复: 27
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tdong06

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】质粒提的量不多已有14人参与

我最近做了个枯草芽孢杆菌的gfp质粒的电转化,质粒电转化进去之后再从枯草芽孢杆菌里抽提质粒,抽提的量就显得很少,带很淡。与大肠中的质粒相比就差多了,不知道是什么原因?
大家帮忙分析下。。。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tdong06

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wangqk198738 at 2010-05-30 14:28:49:

不透明沉淀——你可以使劲吹打啊,用枪头搅拌一下,不久碎开了。对伐!

会有DNA污染的,在溶液2加入的时候要小心的转动的。
24楼2010-05-31 11:02:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-28 22:50:47
这很正常吧,枯草芽孢杆菌不像大肠杆菌那么容易培养吧,所以可能提出来的质粒的量就不高。
2楼2010-05-28 18:44:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

桂花啊

铁虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-28 22:50:57
质粒电转化的效率高吗?做检测了吗?
3楼2010-05-28 19:53:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tdong06

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 桂花啊 at 2010-05-28 19:53:05:
质粒电转化的效率高吗?做检测了吗?

这个与转化效率的关系应该不是很大吧?我是挑选有绿色荧光的转化子加抗生素摇的,摇了24h后那个OD达到2.0的样子,用质粒试剂盒提取质粒,平常的大肠杆菌之类都是很容易抽提得到很亮的条带,但是这个枯草芽孢杆菌是不行的。所以这个不知道是怎么回事,是不是枯草芽孢的细胞壁比较厚呢?
4楼2010-05-28 20:47:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见