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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于PCR的问题
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Kirsten_hkm

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于PCR的问题 已有10人参与

这是我在小木虫上的处女贴。。。
诚心请教一下大家，最近跑PCR结果让我很挫败！两星期前很稳定的条件突然什么都跑不出了，连引物二聚体也没有，请问一下大家可能是什么原因？
还有，有时候取PCR结果时发现液体都在管壁上，离心了才会下来，会是什么原因？会对结果又影响吗？
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1楼 2010-05-23 15:09:02
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-23 22:20:54
引用回帖:
Originally posted by Kirsten_hkm at 2010-05-23 16:49:17:

恩，是的，拿出来的时候感觉壁上也不太多，离心之后就达到PCR之前的体积了，那这样的问题是不是在一开始时候加热热盖就可以克服了？

一开始加热热盖是对的，但是你现在可能整个过程没有热盖，或者热盖温度不对，你看一下你的设置，105度是正常热盖温度，除非你的实验有特殊说明，不然不要改动
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13楼2010-05-23 17:48:39
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):有可能 2010-05-23 16:21:48
对于不出结果的问题，估计是你的酶有问题或者操作失误
   对于第二问题：你可能加好混合物P之前没有离心吧。
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望大家都各有所获！
2楼2010-05-23 15:17:14
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cqyniu

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是换了什么组分呢？你做PCR的时候是不是没有热盖啊
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4楼2010-05-23 15:46:58
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hong303030

金虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-23 16:22:42
可以试一下换一管新的酶再试一下，加入矿物油了吗？加了的话，应该不会蒸到管壁上吧，或者换一个PCR仪试一下，有可能是pcr仪热盖有问题，温度不稳定
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5楼2010-05-23 16:05:11
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