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zyx3302327

新虫 (小有名气)

[交流] 【交流】多糖提取 已有16人参与

最近在做一个中药多糖的提取分离量比较大有30kg的药材,先乙醇提取除去脂溶性物质,在用水提取多糖,将得到的水提液浓缩到适当比例,用乙醇沉淀总醇度在70%左右,离心得到沉淀物,将沉淀物用蒸馏水溶解适量,再离心除去不溶物,加入1/5体积的氯仿,1/5氯仿体积的正丁醇,阵摇3min,离心除去蛋白,再用乙醇沉淀多糖离心得到多糖沉淀物,但是一个问题是好像多糖物质不多啊,别人做同一药材的多糖提取多糖的得率好像比我的大很多,问题出在哪呢?
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simm

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-08-20 21:48:09
除了上边同学的原因,另外
1. 同一药材,不同产地,季节,甚至不同批次,糖含量不同。
2. 醇沉时提取液的浓度,如果过稀,多糖容易沉淀不完全。大量体积的药材醇沉这步可以用工业乙醇来沉淀,加入溶液的三倍体积乙醇测定,4度静置过夜,再离心沉淀。
3. 你采用的是sevag法去蛋白,应该将样品配成5%水溶液,离心出去不溶物,上清液加入同体积的4:1氯仿-正丁醇混合液,振摇,分层,取上清液。反复两次。
13楼2011-08-20 19:02:01
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塞尔达

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
醇沉一定要在低温下过夜进行(一般温度控制在4℃),还有就是多糖可能随样品的保存时间的增加而减少,这些都要考虑一下
菩提本无树,明镜亦非台。本来无一物,何处惹尘埃。
14楼2012-04-19 19:03:05
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sarsy

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
可能有几个原因:
1:药材是否粉碎只够了,水提可能不完全;
2、evage法脱蛋白比例不对吧;
3、乙醇的浓度是否达到多糖完全沉淀的浓度!
12楼2011-08-20 10:19:52
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普通回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
westzilch(金币+1):谢谢交流! 2010-05-21 20:27:24
我们用乙醇沉淀完之后是要低温过夜的,而不是直接离心。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-05-21 20:03:17
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liyun8083

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
离心时可控制低温在较低温度
好事多磨,坚持走下去!Happy Sea!
3楼2010-05-21 20:24:41
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zyx3302327

新虫 (小有名气)

多糖沉淀的醇浓度一般要求达到多少
4楼2010-05-21 21:45:24
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xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢! 2010-08-01 23:51:57
文献也是用的相同的方法吗?
你乙醇提取药材的时候用的比例是多少?会不会提走多糖
醇沉也是关键步骤,可能问题出在这了
欢迎您来药学版~
5楼2010-05-21 22:59:30
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pysfood

铜虫 (初入文坛)

乙醇浓度可能低了
6楼2010-07-29 00:46:56
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leeyaoting

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
做几个梯度的乙醇浓度提取对比,乙醇浓度也不是越高就效果越好
以农为本,达济天下
7楼2010-07-29 17:35:25
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三生有幸

金虫 (小有名气)


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我前几天也想提多糖,但是是直接用80%提的,含量也不是很高,我想知道水提醇沉的具体步骤,还有蒽酮比色怎么操作,我的数据不是很好,愁
山外有山,人外有人。
8楼2010-07-31 08:34:08
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hnw721

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zyx3302327 at 2010-05-21 21:45:24:
多糖沉淀的醇浓度一般要求达到多少

我们用的是无水乙醇!
9楼2010-07-31 12:32:37
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风录之翼

银虫 (小有名气)


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可能是正丁醇和氯仿的比例弄错了……
sevage法脱蛋白:正丁醇和氯仿的混合液 比例为正丁醇:氯仿=1:4或1:5
10楼2010-08-01 22:11:24
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