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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】从植物总RNA中如何分离mRNA
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miho

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】从植物总RNA中如何分离mRNA 已有10人参与

RT，大家分离mRNA的方法有哪些，要使用试剂盒吗？
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逃离地球，去水星！
1楼 2010-05-19 20:17:01
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hyw1989960

木虫 (正式写手)

快乐家族二十八
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个需要分离吗？提取的都是总RNA反正接着反转录了，
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快乐家族
2楼2010-05-19 20:25:57
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
试剂盒 clontech。。。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-05-19 20:26:35
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲
★ ★ ★ ★
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lstt09nk(金币+3):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 21:21:24
1、楼主的意思是必须纯化mRNA？
2、宝生物有mRNA纯化试剂盒，采用oligodT 结合原理，过柱子。大约2K。
3、clontech也有，也不便宜。呵呵
4、沉淀mRNA时候往往产量很低啊，因为mRNA占RNA总量的4-5%，再加上提取中的损失，纯化中的损失，这样，得到的最终mRNA产量不多。
5、那么要求尽量多准备一些高质量的RNA，对mRNA要求浓度较高时候，可再次沉淀浓缩。

祝福好运！
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4楼2010-05-19 21:17:43
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huaq1984

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
反转不就可以啦
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5楼2010-05-19 21:49:10
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miho

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-05-19 20:26:35:
试剂盒 clontech。。。

谢谢！
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逃离地球，去水星！
6楼2010-05-20 22:48:30
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jasco

木虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-21 13:01:33
肯定用试剂盒，takata，clontech，qiagen，invitrogen。。。。都有

另外，植物组织mRNA的提取得率很低，基本在2%就很不错了
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7楼2010-05-21 10:11:34
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bbyu007

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
推荐qiagen

记住不是分离，而是只能提高mrna的含量比例
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我是笨笨鱼~~~
8楼2010-05-21 11:17:27
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
记得本科实验室用的是biozol 好像 之后就是氯仿异戊醇等去蛋白的常见核酸提取操作 可以试一下
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9楼2010-05-21 13:02:04
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
clotech的mRNA纯化试剂盒挺好用的
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10楼2010-05-21 21:33:55
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