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【求助/交流】从植物总RNA中如何分离mRNA
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miho
铁虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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虫号: 824774
注册: 2009-08-09
专业: 生理生态学
[交流]
【求助/交流】从植物总RNA中如何分离mRNA
已有10人参与
RT,大家分离mRNA的方法有哪些,要使用试剂盒吗?
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逃离地球,去水星!
1楼
2010-05-19 20:17:01
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老夏853
铁杆木虫
(著名写手)
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注册: 2007-11-20
专业: 食品加工技术
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
记得本科实验室用的是biozol 好像 之后就是氯仿异戊醇等去蛋白的常见核酸提取操作 可以试一下
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9楼
2010-05-21 13:02:04
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hyw1989960
木虫
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快乐家族二十八
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(幼儿园)
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虫号: 993370
注册: 2010-04-10
性别: GG
专业: 植物生理与生化
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
这个需要分离吗?提取的都是总RNA反正接着反转录了,
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快乐家族
2楼
2010-05-19 20:25:57
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fungixx
至尊木虫
(文坛精英)
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虫号: 860534
注册: 2009-09-30
专业: 抗肿瘤药物药理
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
试剂盒 clontech。。。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼
2010-05-19 20:26:35
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zhwenxing
木虫
(著名写手)
尛森蟲
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注册: 2008-09-09
专业: 疫苗学
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 21:21:24
1、楼主的意思是必须纯化mRNA?
2、宝生物有mRNA纯化试剂盒,采用oligodT 结合原理,过柱子。大约2K。
3、clontech也有,也不便宜。呵呵
4、沉淀mRNA时候往往产量很低啊,因为mRNA占RNA总量的4-5%,再加上提取中的损失,纯化中的损失,这样,得到的最终mRNA产量不多。
5、那么要求尽量多准备一些高质量的RNA,对mRNA要求浓度较高时候,可再次沉淀浓缩。
祝福好运!
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4楼
2010-05-19 21:17:43
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