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dldw2008

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】关于HRP的使用问题 已有2人参与

如题
大家好,我实验中用到辣根过氧化物酶(HRP),说明书上说它的最佳pH在6.0-6.5,但我实验条件要求在5.5的条件下配制辣根过氧化物酶的溶液,在这种条件下HRP会失活吗?谢谢啦~~
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

不会,靠,还有字数限制
再说,你自己试一下不就知道了么?
For my life!
2楼2010-05-10 21:23:21
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dldw2008

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by winter_gates at 2010-05-10 21:23:21:
不会,靠,还有字数限制
再说,你自己试一下不就知道了么?

这位哥火气不小啊,我外行,不懂,再说哪有什么字数限制?你电脑出问题了吧
3楼2010-05-10 21:28:21
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

不是啊,我刚开始就打了两个字,系统字数限制,没对你生气,千万莫怪……
自己在溶液里面试一下,简单的很
For my life!
4楼2010-05-10 21:29:31
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dldw2008

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by winter_gates at 2010-05-10 21:29:31:
不是啊,我刚开始就打了两个字,系统字数限制,没对你生气,千万莫怪……
自己在溶液里面试一下,简单的很

我那酶就10mg,说明书上让最好在原装瓶内溶解,如果试了,酶失活啦,那不完了,肯定又被导师批啦~~
5楼2010-05-10 21:35:41
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

dldw2008(金币+1):谢啦,火气哥~~ 2010-05-10 21:48:41
dldw2008(金币+1): 2010-10-16 09:39:17
这个简单,HRP的酶活高的很,10mg足够你用的,一般的使用浓度都在微克每毫升一下,测酶活都在纳克以下的水平。你按照一般高点的浓度溶解,用最适的buffer,然后用你所需要的buffer大量稀释一下就可以了。纳克级别测活性都嫌多的
For my life!
6楼2010-05-10 21:38:14
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dldw2008

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by winter_gates at 2010-05-10 21:38:14:
这个简单,HRP的酶活高的很,10mg足够你用的,一般的使用浓度都在微克每毫升一下,测酶活都在纳克以下的水平。你按照一般高点的浓度溶解,用最适的buffer,然后用你所需要的buffer大量稀释一下就可以了。纳克级别 ...

我买的HRP 酶活度是300 units/mg,这种好像是酶活度最低的,能行吗?
7楼2010-05-10 21:47:32
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

dldw2008(金币+2):谢谢啦~~ 2010-05-11 08:20:08
dldw2008(金币+2): 2010-10-16 09:39:10
1个酶活力单位是指在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量,或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。
酶活力单位:用来表示酶活力大小的单位,通常用酶量来表示。
其中一个称酶活力国际单位,规定为:在特定条件下,1分钟内转化1微摩尔底物,或者底物中1微摩尔有关基团所需的酶量,称为一个国际单位(IU,又称U)。
另外一个国际酶学会议规定的酶活力单位是Kat,规定为:在最适条件下,1秒钟能使1摩尔底物转化的酶量。
Kat和U的换算关系:1 Kat=6×107U, 1U=16067n Kat
酶的比活力(specific activity):是指每毫克质量的蛋白质中所含的某种酶的催化活力。是用来度量酶纯度的指标。是生产和酶学研究中经常使用的基本数据。

恩,上面就是些基本概念了。该酶的比活是相当的高,很容易测的。如果你不放心,可以先梯度试一下,呵呵。
For my life!
8楼2010-05-10 22:08:56
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