应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有用pfu的吗，求教
54/1返回列表
查看: 2026  |  回复: 32
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】有用pfu的吗，求教 已有15人参与

这个学期开学来就一直在用高保真酶PCR,先用Taq做TD-PCR(65-50),35cycle,出来的条带很亮，可是用pfu在同样的反应条件下（延伸时间由1min改为2min）,却出不来条带，要么是前段的引物二聚体，要么是弥散带，反正就是不出来我要的带，实验进展因此耽搁了好多，望各位高手赐教，附图。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-05-10 13:08:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

raodazhang

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk:友情提示：你可以升级了，点击升级即可~~ 2010-05-12 12:03:21
做个温度梯度就行了 应该是退火温度的问题吧 最好再做个阳性对照 就知道问题出在哪了
赞一下(2人) 回复此楼
31楼2010-05-12 04:49:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 33 个回答

霖希

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我以前在学校也遇到过类似的情况，是不是可以稍微改变一下退火温度？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-05-10 14:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biogefart

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):good！ 2010-05-12 08:15:44
pfu 的效率比taq低很多，我看你的产物也不是很长，taq的突变率不至于产生突变，还是用tag吧，
赞一下(2人) 回复此楼
闹太套
3楼2010-05-10 15:20:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

miya173

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
仔细看看pfu的说明书啊，pfu的体系连加样顺序都跟其它的没不一样，taq一分钟可以扩2K，pfu是推荐按一分钟扩500bp计算。自己仔细看看吧。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-05-10 15:32:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 33 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭