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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】抑菌试验求助
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wlw1013

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】抑菌试验求助 已有34人参与

想用琼脂扩散法做一下抑菌试验，看见文献上有用打孔的方法，想问一下：打孔的时候，孔的深度怎末控制呢？是打到培养基高度的一半呢，还是打到培养皿的底部呢？
如果打到培养基底部话，那么孔里面加入的抑菌物质不会再平皿底部随着平皿而扩散吗？这不就失去了抑菌试验的意义了吗？
谢谢大家啦！
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1楼 2010-05-05 15:04:39
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xiaojingyang

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你铺两层培养基，底部为普通培养基，作用主要是使牛津杯处在同一水平面上，减少误差。在铺完第一层后，放置牛津杯，到第二层含菌培养基，凝固后取出牛津杯，加入拮抗液即可!
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21楼2010-07-01 19:35:38
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dujingfang

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by wlw1013 at 2010-05-05 15:56:47
那出来孔之后，牛津杯要拿掉吗？
我的意思是说：1 先弄出孔来，拿掉牛津杯
                     2 然后涂布细菌
                     3 一定条件下培养

对吗？

先在90mm的平板上倒上15ml的素琼脂，作为下层培养基，待其凝固后放上牛津杯，轻轻放上即可，一般对称放置，然后倾倒含有指示菌的培养基25ml，作为上层培养基，注意千万不要没过牛津杯，待其凝固后拿出牛津杯，在孔里加入200ul的抑菌物质，抑细菌的话不必放在冰箱扩散，直接37度恒温培养即可。
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46楼2013-11-16 11:17:36
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普通回帖

乖乖猫儿

银虫 (初入文坛)
wlw1013(金币+1):您好，好像不是吧 2010-05-05 15:17:58
插入的抑菌杯要插入培养基底部，否则注入的菌会从底部扩散，影响最后的观察效果
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在人生的道路上，有些黑暗，只能自己穿越；有些痛苦，只能自己体验；有些孤独，也只能自己品尝……人生是没有捷径的！
2楼2010-05-05 15:11:00
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
wlw1013(金币+2): 2010-05-05 15:54:11
lmzxcom1:鼓励交流 2010-06-22 16:00:03
先倒上一层薄的培养基，再放上牛津杯，再倒一层培养基就行了。等培养基凝固了，取出牛津杯不就有孔了么？这种方法很方便的！
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3楼2010-05-05 15:47:50
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wlw1013

木虫 (小有名气)

wordsworth3180

那出来孔之后，牛津杯要拿掉吗？
我的意思是说：1 先弄出孔来，拿掉牛津杯
                     2 然后涂布细菌
                     3 一定条件下培养

对吗？
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4楼2010-05-05 15:56:47
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chenyyy

无虫 (正式写手)
wlw1013(金币+1):?呵呵，可是我没有呀 2010-05-06 14:16:34
参考药理学书，写得很清楚
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5楼2010-05-06 14:06:24
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biochem301

银虫 (小有名气)
wlw1013(金币+2): 2010-05-08 16:56:34
简单方法：用灭菌的滤纸小圆片，放置上面，把溶液加在上面
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6楼2010-05-06 17:19:28
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
wlw1013(金币+2): 2010-05-08 16:57:59
引用回帖:
Originally posted by wlw1013 at 2010-05-05 15:56:47:
那出来孔之后，牛津杯要拿掉吗？
我的意思是说：1 先弄出孔来，拿掉牛津杯
                     2 然后涂布细菌
                     3 一定条件下培养

对吗？

对 要拿掉的，在孔里加抑菌物质
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7楼2010-05-07 18:59:36
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wlw1013

木虫 (小有名气)

wordsworth3180

您好！我见过有的抑菌试验室这样做的，
1）先倒好固体平板
2）然后放上牛津杯
3）再往牛津杯里面加入抑菌物质
4）一定条件下培养该菌

附注：在整个培养过程中，牛津杯是一只在平板里面的，呵呵

和您的说法有点不同哦，请指教~~~谢谢啦！！！
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8楼2010-05-08 17:00:31
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
wlw1013(金币+2): 2010-05-11 10:01:17
引用回帖:
Originally posted by wlw1013 at 2010-05-08 17:00:31:
您好！我见过有的抑菌试验室这样做的，
1）先倒好固体平板
2）然后放上牛津杯
3）再往牛津杯里面加入抑菌物质
4）一定条件下培养该菌

附注：在整个培养过程中，牛津杯是一只在平板里面的，呵呵

和您的说 ...

我理解牛津杯就是制孔用的，我没试过一直放在平板里，不知道会不会对扩散有影响啊。
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9楼2010-05-09 22:03:17
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hanzhinan

木虫 (正式写手)
★
wlw1013(金币+1):谢谢参与
wlw1013(金币+1): 2010-05-21 00:10:39
打孔实验有缺点，对药敏不灵敏的做出结果不好~
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10楼2010-05-20 22:15:31
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