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王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于信号肽的问题 已有7人参与

真菌基因的克隆与表达时,有没有人做过用基因本身的信号肽而去除表达载体上的信号肽的实验,有没有取得想要的结果?以前看文章好像看到过信号肽就用基因本身的文章,但不记得是细菌基因还是真菌基因了,不知道这样做跟用表达载体上的信号肽对实验结果有多大影响,欢迎虫友们进来谈谈你们的看法!
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zxl493

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
呵呵  我顶          新鲜
2楼2010-05-05 08:26:38
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kitty8682

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也很想知道的,学习中
3楼2010-05-05 09:19:09
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+3):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-05 15:34:15
这个一点不新鲜

当然可以的这么做,但首先你要确保你的本身的信号肽会比载体上的信号肽更好~】

在你不确定的请款下,我建议你还是把你的编码区插在载体信号肽下面,毕竟,很多国外公司,做的载体系列,经过不断的改进,所用的信号肽一般都是很稳定的,并且能够被剪切掉(真核)

你时间多的话,可以都做一下,反正载体构建很简单,希望对你有所帮助~
4楼2010-05-05 13:28:57
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王雨云

金虫 (小有名气)

楼上说得很在理,我只是想看看是否有人这样做并取得较好结果,因为大部分文章没有这样做,想看看如果这样会不会有意外的收获,呵呵!
5楼2010-05-05 14:14:50
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qdeev

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果想试一试做这个,除非很有闲心,否则是不是太费时间了?
6楼2010-05-05 14:24:47
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
鼓励LZ都做,把结果给我们说一下,~谢谢了~
7楼2010-05-05 14:31:06
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果用表达载体上的信号肽,合成的肽链会不会长一段,就是说蛋白质本身的信号肽不会被酶切掉
8楼2010-05-05 18:03:55
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王雨云

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-05 18:03:55:
如果用表达载体上的信号肽,合成的肽链会不会长一段,就是说蛋白质本身的信号肽不会被酶切掉

昨天我看了师兄写的毕业论文,其中就说到有人做过用基因本身的信号肽和用表达载体上的信号肽做表达,最后的结果是后者优于前者,一般人做表达都是先将自身信号肽切除,再把切除信号肽的目的基因连接在表达载体信号肽后面。你说的问题貌似不存在哈
9楼2010-05-06 10:02:48
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王雨云

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qdeev at 2010-05-05 14:24:47:
如果想试一试做这个,除非很有闲心,否则是不是太费时间了?

确实是闲时间太多的情况才去做这样的表达,因为一般自己都不太确定基因本身的信号肽要优于表达载体上的信号肽,呵呵!
10楼2010-05-06 10:04:36
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