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birdlivy

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教一个DNA电泳的问题 已有13人参与

我有段DNA想跑凝胶电泳,但是由于只有20几个碱基,所以查了一下文献看到必须要用非变性聚丙烯酰胺凝胶才能分离开。
但是因为没有做过,不知道哪位高手有经验可以指导一下呢?
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378937466

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by xiong-y-x at 2012-07-16 17:31:41
我也和LZ有相同的问题,我的是35个碱基的,貌似这种单链的DNA只能跑PAGE吧,如果楼主清楚了 也告知我一下啊 我们导师让跑的就是聚丙烯酰胺的电泳。可是我一窍不通啊

请问这个样品怎么配呢?怎么加BUFFER呢?我也做这个,想请教一下
15楼2013-05-04 10:40:18
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查看全部 15 个回答

cyjwx123

铁虫 (小有名气)


amisking(金币+1): 2010-05-04 20:46:27
birdlivy(金币+4):O(∩_∩)O谢谢 2010-05-13 10:56:47
琼脂糖凝胶电泳嘛,胶的浓度估计在4%吧,应该可以分离
看的开才是真本事~
2楼2010-05-04 15:53:29
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
amisking(金币+3):鼓励交流 2010-05-04 20:46:39
birdlivy(金币+4):O(∩_∩)O谢谢 2010-05-13 10:57:03
首先,我要问你,你的20bp的是什么产物?是单链退货的?如果是,那浓度应该很高,琼脂糖胶是能看得出来的,即使不到4%,也可以,不然的话,我推荐你跑丙烯酰胺胶,也不难,也可以切胶回收,希望对你有帮助~
3楼2010-05-04 16:33:06
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silicare

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优秀版主

★ ★
lstt09nk(金币+2):热心虫友,感谢交流~~ 2010-05-04 18:31:03
什么叫分辨率? 首先当然是分辨不同的物质了,如果你只有一条带,谈分辨率是没有意义的

所以要看的不是你的条带有多大,而是你要分离的条带直接都多大差别,page胶是用来提高分辨率的

如果你是一条带,跑琼脂糖就可以,不管是20bp还是20kb
4楼2010-05-04 16:38:49
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