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hsiaohu

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】[急问]为什么我的HFL-I细胞长的这么慢 已有2人参与

用的培养基是GIBCO的液体αMEM+10% FBS,代数大概在12代左右吧。
传代是先PBS洗,然后胰酶消化,然后加培养基吹打。
经过几次传代之后越长越慢(都是一传二),以前3-4天,现在8天也才60-70%密度,很难铺满瓶底。而且细胞表面经常有小黑点,传代时细胞密度稍微低一点就有可能长不起来。
今天消化后加培养基吹打时,产生特别特别多的气泡。
请教一下,这些都是什么原因导致的啊,有什么办法能让它长快一些吗?
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在孤獨中享受寂寞,在寂寞中厮殺黎明。我需要的是安靜与潜心。
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hsiaohu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by hsiaohu at 2010-05-01 13:25:15:
用的培养基是GIBCO的液体αMEM+10% FBS,代数大概在12代左右吧。
传代是先PBS洗,然后胰酶消化,然后加培养基吹打。
经过几次传代之后越长越慢(都是一传二),以前3-4天,现在8天也才60-70%密度,很难铺满瓶底。 ...

有可能是支原体污染吗?有什么便捷检测支原体污染的方法吗
在孤獨中享受寂寞,在寂寞中厮殺黎明。我需要的是安靜与潜心。
4楼2010-05-01 23:42:46
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zxl493

铁虫 (小有名气)

我也想了解     谢谢
2楼2010-05-01 13:53:27
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hsiaohu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by hsiaohu at 2010-05-01 13:25:15:
用的培养基是GIBCO的液体αMEM+10% FBS,代数大概在12代左右吧。
传代是先PBS洗,然后胰酶消化,然后加培养基吹打。
经过几次传代之后越长越慢(都是一传二),以前3-4天,现在8天也才60-70%密度,很难铺满瓶底。 ...

是不是代数太高了啊
在孤獨中享受寂寞,在寂寞中厮殺黎明。我需要的是安靜与潜心。
3楼2010-05-01 14:44:39
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hsiaohu

新虫 (小有名气)

顶起来啊,求懂的人帮忙分析啊
在孤獨中享受寂寞,在寂寞中厮殺黎明。我需要的是安靜与潜心。
5楼2010-05-02 21:04:37
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