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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】[急问]为什么我的HFL-I细胞长的这么慢
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hsiaohu

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】[急问]为什么我的HFL-I细胞长的这么慢 已有2人参与

用的培养基是GIBCO的液体αMEM+10% FBS，代数大概在12代左右吧。
传代是先PBS洗，然后胰酶消化，然后加培养基吹打。
经过几次传代之后越长越慢(都是一传二)，以前3-4天，现在8天也才60-70%密度，很难铺满瓶底。而且细胞表面经常有小黑点，传代时细胞密度稍微低一点就有可能长不起来。
今天消化后加培养基吹打时，产生特别特别多的气泡。
请教一下，这些都是什么原因导致的啊，有什么办法能让它长快一些吗？
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在孤獨中享受寂寞，在寂寞中厮殺黎明。我需要的是安靜与潜心。
1楼 2010-05-01 13:25:15
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zxl493

铁虫 (小有名气)
我也想了解     谢谢
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2楼2010-05-01 13:53:27
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by hsiaohu at 2010-05-01 13:25:15:
用的培养基是GIBCO的液体αMEM+10% FBS，代数大概在12代左右吧。
传代是先PBS洗，然后胰酶消化，然后加培养基吹打。
经过几次传代之后越长越慢(都是一传二)，以前3-4天，现在8天也才60-70%密度，很难铺满瓶底。 ...

是不是代数太高了啊
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在孤獨中享受寂寞，在寂寞中厮殺黎明。我需要的是安靜与潜心。
3楼2010-05-01 14:44:39
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by hsiaohu at 2010-05-01 13:25:15:
用的培养基是GIBCO的液体αMEM+10% FBS，代数大概在12代左右吧。
传代是先PBS洗，然后胰酶消化，然后加培养基吹打。
经过几次传代之后越长越慢(都是一传二)，以前3-4天，现在8天也才60-70%密度，很难铺满瓶底。 ...

有可能是支原体污染吗？有什么便捷检测支原体污染的方法吗
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4楼2010-05-01 23:42:46
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
顶起来啊，求懂的人帮忙分析啊
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5楼2010-05-02 21:04:37
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
求懂的人帮忙分析啊
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6楼2010-05-03 22:57:12
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
怎么就没人回啊 HFL-I不算冷僻的细胞吧
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7楼2010-05-04 22:15:48
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
每天来顶一下 期待有高手解答啊
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8楼2010-05-06 00:21:59
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
每天来顶一下 期待有高手解答啊
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9楼2010-05-06 23:11:22
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hsiaohu

新虫 (小有名气)
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10楼2010-05-08 21:29:44
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