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lifeileif

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】Takara试剂盒,合成cDNA看不到弥散,着急啊 已有8人参与

我现在也在做cDNA-AFLP,用Takara试剂盒,货号D6130。我合成cDNA时候,遇到了的问题。第一链合成后,检测结果竟然和RNA电泳图差不多,隐约能看到两条带,分子量和rna也差不多,没有弥散,除了那两条模糊的带,什么都看不见。做了几次结果都差不多。万分着急,希望大侠们能帮我解决。着急中

图片,左面是提的RNA,右边mark后第一孔就是第一链了,第二孔是第二链,什么都看不到。求救啊,感谢感谢

附图
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吉他,计算机
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lifeileif

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by gastrodia at 2010-04-29 16:52:12:
mRNA只占总RNA的1%左右,而且是n多条混合物,你想反转录后就可以看到的可能性不大,直接切了加接头,预扩增之后才可以看的到条带,我觉得你还是先按照试剂盒的说明做下去才好

谢谢,大侠
吉他,计算机
12楼2010-04-29 21:11:36
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
KIT ,你做不好的话,就不知道为什么了,或者你的RNA本身就有问题
2楼2010-04-29 10:33:02
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poog502

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我之前用TaKaRa的效果也不好,后来换了fermentas的反转录酶一下就做出来了,建议试试
3楼2010-04-29 10:41:23
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liyong1981

金虫 (正式写手)


很久很久以前,我好像用的普洛麦格的,很不错
4楼2010-04-29 10:55:38
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