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crazyofmj899木虫 (著名写手)
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【求助】显色方法的选择 已有3人参与
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在用UV测定总皂苷含量时，有的文献采用香草醛－高氯酸，有的直接采用高氯酸，还有的用香草醛－浓硫酸，请问这几种方法的区别在哪里，有什么优缺点吗？显然直接用高氯酸显色最为简便，为什么还要加香草醛呢？ 谢谢了。 |
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yjc6819
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4楼2011-05-29 12:08:06
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westzilch(金币+1):谢谢分享！ 2010-04-30 17:41
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在中药提取物有效成分中，由于皂苷的苷元是甾体或三萜的衍生物，因此，凡对甾体和三萜显色的试剂都可以和皂苷产生颜色反应。常见的显色反应有如下几种类型。 (1)醋酐—浓硫酸反应(Liebermann-Burchard反应) 取少量皂苷样品溶解于酸酐或氯仿中，加人浓硫酸—醋酐试剂，能产生颜色变化，呈现黄一红—>蓝+紫—>绿的颜色变化。甾体皂苷在颜色变化中最后呈显绿色，而三萜皂苷只能转变为红色、紫色或蓝色，不出现绿色。 (2)三氯醋酸反应(Rosen-Heimer反应) 将皂苷样品溶液滴在滤纸上，加三氯醋酸试剂一滴，加热，生成红色并渐变为紫色。甾体皂苷反应快，只需加热至60℃即生成红色并渐变为紫色。在同样情况下，三萜皂苷必须加热到100℃才能显色，也生成红色转紫色。此显色反应可用于皂苷的纸色谱显色。 (3)氯仿—浓硫酸反应(Salkowski反应) 将皂苷样品溶于氯仿，加入浓硫仿层呈现红或蓝色，浓硫酸层有绿色荧光出现。 (4)冰醋酸—乙酰氯反应(Tschugaeff反应) 将皂苷样品溶于冰醋酸中，加入乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。 (5)五氯化锑反应(Kah|enberg反应) 皂苷与五氯化锑的氯仿溶液反应呈紫色。 由上述反应可以看出，皂苷所用的显色试剂和用在强心苷和甾醇上的一样，都是一些酸类，如硫酸、盐酸、磷酸、三氯醋酸，也包括一些广义的Lewis氏酸类，如三氯化锑、二氯化锌等。这些酸的作用原理主要包括皂苷水解成苷元、羟基脱水成双键、双键移位、分子间缩合、使脂环上产生共轭双键而与浓硫酸等反应而呈现多种不同的色调，或在紫外光下呈现荧光。显色反应的快慢主要决定脂环上原来存在的双键的多少、羟基的多少，脂环上原有共轭双键的呈色很快，环上只有孤立双键的呈色慢，完全饱和、羟基又少的不呈色。甾体皂苷的显色反应比三萜皂苷快，因为三萜脂环上的碳原子甲基取代多而变化稍慢。 http://www.chemdrug.com/databases/7_13_jrjvqpuevqdlunag.html再看看这篇文献会对你有帮助 [ Last edited by niuxiaohui on 2010-4-29 at 12:41 ] |
2楼2010-04-29 12:39:02
crazyofmj899
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3楼2010-04-29 15:08:40
