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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】想问一下凝胶电泳缓冲溶液的配置
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jiaqch111

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】想问一下凝胶电泳缓冲溶液的配置 已有7人参与

我想做个凝胶电泳，但是缓冲溶液不太清楚怎么配置，我看到我们实验室有原来师姐留下的药品，有一瓶是10XTE，不知道TE和TAE、TBE有什么区别呢？在网上看到有个1TE的配方，是不是我用的时候将那个10TE的稀释十倍就行了呢？
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1楼 2010-04-26 10:39:32
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shuwenying

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3): 2010-04-26 12:35
jiaqch111(金币+3):谢谢 2010-04-26 14:30
你是做什么凝胶电泳？？？琼脂糖吧？TE是用来溶解DNA之类的，不是用来电泳的。

TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小，长时间电泳（如过夜）不可选用，除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。
      TBE的特点是缓冲能力强，长时间电泳时可选用TBE，并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用，并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收电泳中使用。

  我们跑琼脂糖凝胶电泳用的是0.5*TBE，配制琼脂糖凝胶也是用0.5*TBE的，电泳液的使用浓度常常是各个实验室根据自己的情况定的，我们也没有具体研究过浓度问题，实验室一贯用这个浓度，就用这个浓度了
  TAE似乎跑电泳会快一点，TBE容易沉淀而且不能配制太高的储备液浓度，但是个人觉得，TBE跑出来的条带好看一点啊，我们实验室一贯用TBE的。
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2楼2010-04-26 10:51:28
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jiaqch111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by shuwenying at 2010-04-26 10:51:28:
你是做什么凝胶电泳？？？琼脂糖吧？TE是用来溶解DNA之类的，不是用来电泳的。

TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子 ...

谢谢，我是做琼脂糖凝胶电泳。
然后我还想做pcr，但是我的菌是未知的怎么办呢，可以直接用通用引物吗？
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3楼2010-04-26 11:08:30
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wwllkkhh

金虫 (小有名气)
jiaqch111(金币+2):谢谢 2010-04-26 14:30
TAE就可以了，电泳胶要按比例配置，一般为1%-2%
通用引物可以
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牛~逼~哄~哄
4楼2010-04-26 13:33:57
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★
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jiaqch111(金币+2):谢谢 2010-04-26 14:30
TBE 比TAE稳定。 TAE用的u最多。随便找个 产品目录或者 分子实验指南 之类的书都有配置。

一般配的是 10x 的 TAE。用的时候稀释十倍溶胶跑胶
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5楼2010-04-26 14:23:56
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jiaqch111

银虫 (正式写手)
谢谢各位啦
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6楼2010-04-26 14:28:10
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

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优秀版主
★
jiaqch111(金币+1):谢谢参与
TAE吧，tbe贵
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7楼2010-04-26 15:11:02
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
配50×TAE储液 用时稀释
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8楼2010-04-27 12:14:05
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shenqushen

木虫 (正式写手)
Thank you
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我要成为本专业中国前十名的人！
9楼2011-11-17 07:53:04
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