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【求助】关于水相中EDCI缩合反应条件和DTT颜色变化问题已有2人参与
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最近在做一个修饰透明质酸的实验，目的是键合上巯基： 方法：1、用EDCI让透明质酸上的羧基与二硫代丙酸酰肼反应（中间是一二硫键），然后用DTT打开二硫键，游离出巯基 问题：1、关于EDCI缩合反应：a：看见很多帖子说该试剂是要在无水条件下反应，pH偏碱，而参考的文献是在水相中反应，pH为4.75；b：我做的时候有点奇怪，我是先加二硫代丙酸酰，调pH4.75，EDCI加入后，体系pH缓缓上升到6.6左右，我继续调酸，发现把酸度调下来，pH又慢慢升回去，调下去又升上来，无论我加1ml酸，还是3ml酸，最终pH都是六点多，不知是否应该加入更大量酸，调到pH4.75为止。 2、关于DTT反应：文献上DTT调pH8.5反应24h，调pH3.5终止反应，我做过几回，有时DTT加入后颜色变红，调pH3.5后，颜色退去，有一次是pH调成3.5后红色布退，有2次是DTT加入后部显淡红色，想知道DTT的颜色到底有什么有关。 问题太多，请高手们不吝赐教！ |
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2楼2010-04-27 10:46:11
hukeling
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3楼2014-06-21 09:33:31