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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关DEAE sepharose ff 的问题
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hare1212

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关DEAE sepharose ff 的问题 已有2人参与

我用的DEAE sepharose ff 用2M NaCl和1M NaOH 再生后，用Tris-HCl平衡，走了5个CV后，发现流出液的pH较平衡缓冲液的pH高很多，而电导率却只有0.08，不能达到平衡缓冲液的电导率。请问这是什么问题呢？是不是柱子被洗坏了呢？急等回复，十分感谢！
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1楼 2010-04-20 23:02:16
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
hare1212(金币+1): 2010-04-21 12:07
1M NaOH 再生后先用高盐溶液（1M NACL）平衡，可以较快的把PH降下来
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3楼2010-04-21 08:06:43
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
hare1212(金币+1): 2010-04-21 12:07
可以很肯定的告诉你，你平衡体积不够。
1M NaOH是强碱，你用这种缓冲能力比较弱的Tris-cl缓冲只平衡了几个体积，怎么可能平衡过来？pH高就说明了这个问题。
另外，GE的填料一般都是很结实的，可以耐强酸强碱。只要不长时间浸泡，一般不会有问题。随便整。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2010-04-20 23:17:06
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