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hare1212

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关DEAE sepharose ff 的问题 已有2人参与

我用的DEAE sepharose ff 用2M NaCl和1M NaOH 再生后,用Tris-HCl平衡,走了5个CV后,发现流出液的pH较平衡缓冲液的pH高很多,而电导率却只有0.08,不能达到平衡缓冲液的电导率。请问这是什么问题呢?是不是柱子被洗坏了呢?急等回复,十分感谢!
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

hare1212(金币+1): 2010-04-21 12:07
可以很肯定的告诉你,你平衡体积不够。
1M NaOH是强碱,你用这种缓冲能力比较弱的Tris-cl缓冲只平衡了几个体积,怎么可能平衡过来?pH高就说明了这个问题。
另外,GE的填料一般都是很结实的,可以耐强酸强碱。只要不长时间浸泡,一般不会有问题。随便整。
生物资源交流QQ群:1044518333
2楼2010-04-20 23:17:06
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

hare1212(金币+1): 2010-04-21 12:07
1M NaOH 再生后先用高盐溶液(1M NACL)平衡,可以较快的把PH降下来
3楼2010-04-21 08:06:43
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