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金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关DEAE sepharose ff 的问题已有2人参与

我用的DEAE sepharose ff 用2M NaCl和1M NaOH 再生后，用Tris-HCl平衡，走了5个CV后，发现流出液的pH较平衡缓冲液的pH高很多，而电导率却只有0.08，不能达到平衡缓冲液的电导率。请问这是什么问题呢？是不是柱子被洗坏了呢？急等回复，十分感谢！

1楼 2010-04-20 23:02:16

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木虫 (著名写手)

hare1212(金币+1): 2010-04-21 12:07

可以很肯定的告诉你，你平衡体积不够。
1M NaOH是强碱，你用这种缓冲能力比较弱的Tris-cl缓冲只平衡了几个体积，怎么可能平衡过来？pH高就说明了这个问题。
另外，GE的填料一般都是很结实的，可以耐强酸强碱。只要不长时间浸泡，一般不会有问题。随便整。

生物资源交流QQ群：1044518333

2楼2010-04-20 23:17:06

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木虫 (知名作家)

hare1212(金币+1): 2010-04-21 12:07

1M NaOH 再生后先用高盐溶液（1M NACL）平衡，可以较快的把PH降下来

3楼2010-04-21 08:06:43

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