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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR 一般几个循环较好呀？
汕头大学海洋科学接受调剂
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zhongjue

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR 一般几个循环较好呀？ 已有4人参与

昨天DNA扩增，32个循环还跑不出带，要几个循环好呀？
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1楼 2010-04-19 15:14:20
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
zhongjue(金币+1):谢谢指教！ 2010-04-19 16:31
==b
扩不出来不一定是循环数的问题
你先做一个positive control看看模板和试剂有无问题先
如果出得来，看看是不是引物设计的问题
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2楼2010-04-19 15:30:29
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-04-19 21:19
要是你的PCR系统没问题，32个循环应该能扩出特异带！没扩出来主要可能你的模板或者引物有问题（当然你所用的酶、dNTP、缓冲液必须是没问题的情况下！）！
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大家共同交流、共同提高！！！
3楼2010-04-19 16:30:15
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hyde0706

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-04-19 21:19
一般30-40个循环。如果32个还没扩增出来，肯定是体系的问题，也有可能是模板量太低。
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4楼2010-04-19 19:56:20
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85715623

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-04-19 21:19
30-35个就可以啊。这里面的原因较多，是不是少加试剂了？配比不合适？
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5楼2010-04-19 20:29:00
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