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hare1212

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关蛋白质测序 已有2人参与

我现在做一个细菌分泌到胞外的天然蛋白质,这个蛋白对于我是未知蛋白,如果我想克隆这个蛋白的基因,该如何做?是否要测蛋白质序列呢?
我目前查到的蛋白质测序只有N-端测序,用Edman降解后作HPLC;还有就是用质谱法,但是我咨询到质谱是把蛋白质酶切成肽段,测序肽段的氨基酸序列,大概能测1~3个肽段。
请问各位大侠,鉴于我的实验要求以及我做的是细菌(原核生物)的蛋白质,要向克隆目的基因,该用何种测序方法呢?后续又该如何操作克隆基因呢?
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qdeev

金虫 (正式写手)

★
lstt09nk(金币+1): 2010-04-19 19:23
hare1212(金币+1): 2010-04-19 19:57
首先测蛋白的N端,进Blast比对,找到相似度最高的蛋白序列,找到该蛋白的基因,设计PCR引物,看能不能把你要的基因调出来。
3楼2010-04-19 19:15:01
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hare1212

金虫 (小有名气)

自己顶一下,请大家踊跃发言啊!
2楼2010-04-19 15:37:52
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