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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关蛋白质测序
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【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 hare1212 的 9 个金币

hare1212

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关蛋白质测序 已有2人参与

我现在做一个细菌分泌到胞外的天然蛋白质，这个蛋白对于我是未知蛋白，如果我想克隆这个蛋白的基因，该如何做？是否要测蛋白质序列呢？
我目前查到的蛋白质测序只有N-端测序，用Edman降解后作HPLC；还有就是用质谱法，但是我咨询到质谱是把蛋白质酶切成肽段，测序肽段的氨基酸序列，大概能测1~3个肽段。
请问各位大侠，鉴于我的实验要求以及我做的是细菌（原核生物）的蛋白质，要向克隆目的基因，该用何种测序方法呢？后续又该如何操作克隆基因呢？
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1楼 2010-04-19 12:26:13
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hare1212

金虫 (小有名气)
自己顶一下，请大家踊跃发言啊！
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2楼2010-04-19 15:37:52
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qdeev

金虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1): 2010-04-19 19:23
hare1212(金币+1): 2010-04-19 19:57
首先测蛋白的N端，进Blast比对，找到相似度最高的蛋白序列，找到该蛋白的基因，设计PCR引物，看能不能把你要的基因调出来。
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3楼2010-04-19 19:15:01
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